Table of Contents Table of Contents
Previous Page  186 / 454 Next Page
Information
Show Menu
Previous Page 186 / 454 Next Page
Page Background

ального центрифугирования. Белки постмитохондриального экс­

тракта разделяли по их устойчивости к тепловой денатурации (10

мин., 75°С) на термолабильную и термоустойчивую фракции. Во

втором случае белки экстрагировали из ткани солевым буфером

(1М NaCl, 0,1М Трис, pH - 8), экстракт диализовали против воды,

водорастворимую фракцию разделяли на термолабильные и тер­

мостабильные белки. Во всех случаях на каждом этапе получали

образцы белка для анализа их полипептидного состава методом

SDS- ПААГ в восстановленных диссоциирующих условиях.

Результаты грубого расчета при анализе распределения сум­

марного белка семядолей показали следующее. 1) Основная масса

белка в семядолях, как и в осях, приходится на растворимую

фракцию клетки, т.е., обнаруживается в постмитохондриальном

экстракте, или цитозоле, в то время как доля белка субклеточных

структур (20 тыс. g-осадок) незначительна. 2) Белки семядолей

легко извлекаются 1М NaCl. 3) Экстрагируемые солью белки се­

мядолей на 90% оказались водорастворимыми белками, т.е., аль­

буминами. 4) Основная масса (более 80%) водорастворимых бел­

ков семядолей, в отличие от белков осей, устойчива к тепловой

денатурации и может быть отнесена к термостабильным белкам,

как и подавляющая часть суммарного белка постмитохондриаль­

ного экстракта семядолей. Таким образом, в клетках запасающей

паренхимы семядолей преобладающими белками являются легко-

растворимые, чрезвычайно гидрофильные термостабильные белки

альбуминового типа.

Анализ полипептидного состава выявил большое сходство

между суммарными белками гомогената семядолей, белками по­

стмитохондриального экстракта с суммарными NaCl-экстрагируе­

мыми белками и суммарными термостабильными белками семядо­

лей. Во всех случаях доминировали две группы мажорных термо­

стабильных полипептидов: гомогенный компонент с мол. м. около

24-25 кД и гетерогенная группа из 3- 4 полипептидов с мол. м. 6-

12 кД. Сходные термостабильные полипептиды обнаружены нами

ранее в белках осевых органов. В структуру нативных термоста­

бильных белков определенный вклад вносят S-S-связи. В отсутст­

вие восстанавливающего агента компонент с мол. м. 24-25 кД

179

Научная электронная библиот ка ЦНСХБ