ЭлБиб

дикации антител против токсоплазм в сыворотках крови кошек.

Токсоплазменные антитела выявлялись в реакциях связывания компле

мента (РСК) и методом иммуноферментнош анализа (ИФА). В серологичес

ких тестах испытывали сыворотки подозрительных по заболеванию кошек.

РСК проводили согласно «Методическим указаниям по лабораторной

диагностике токсоплазмоза животных», утвержденным Департаментом ве

теринарии Минсельхозпрода РФ 11 июня 1999 г. (№ 13-7-2/598).

ИФА выполняли по непрямому методу при помощи разработанной

нами тест-системы. Опыты выполняли на полистероловых планшетах, изго

товленных на ПО ВНИИ медицинской техники (г. Москва). В качестве конъ

югата использовали белок А, меченный пероксидазой хрена, который по

лучали из НПО «Пептоскрин-2» (г.Электросталь).

Исследуемые и контрольные сыворотки разводили 1:100. Результаты ИФА

регистрировали с помощью спектрофотометра Multiskan. Результат подлежал

учету, если среднее значение ОП отрицательных контролей (ОП ср. К-) не пре

вышало ОД оптические единицы (о.е.), а среднее значение ОП положительных

контролей (ОП ср. К+) составляло не менее 0,8 о.е. Положительными считали

образцы исследуемых сывороток, где ОП превышала критическое значение

ОП (ОП крит.), которое рассчитывали по формуле: ОП крит.=ОП ср. К -+0,2.

При исследовании сывороток крови 56 кошек, подозрительных по забо

леванию токсоплазмозом, используя разработанный нами иммунофермен-

тный тест, было выявлено 8 положительно реагирующих пробы (14,29%). В

РСК при этом реагировали 3 сыворотки крови (все они оказались позитив

ными в ИФА). При прямой микроскопии образцов фекалий у этих живот

ных нам удалось обнаружить ооцисты только у 1 кошки (сыворотка крови,

которой реагировала и в РСК, и в ИФА).

Подобранные нами условия выполнения ИФА позволяют также вести

визуальный учет результатов реакции. Исследуемый образец оценивали как

положительный, если имелись отчетливые различия в интенсивности окра

шивания раствора субстрата в лунках с исследуемой пробой по сравнению с

таковыми в лунках с контролем субстрата и отрицательной сывороткой.

Данное качество сконструированной тест-системы дает широкую воз

можность ветеринарным лабораториям, не оснащенным фотометрами,

проводить первичный иммунологический скрининг инфицированности

кошек токсоплазмами.

Научная электронная библиотека ЦНСХБ