ЭлБиб

Таблица 2

Генетические ресурсы и интродукция

Мультипликация побегов прегенеративных растений Thermopsis lanceolata in vitro

Варианты Возрастныесостояния

растений

Коэффициентмультипликации

побегов

Проростки

6.7±0.6

Ювенильные

20.0±1.28

Иммахурные_____

12.5±1.33

Коэффициент мультипликации, определяемый через месяц культивирования, у ювенильных растений превос

ходит этот показатель у проростков и имматурных растений и поэтому для массового размножения растений тер

мопсиса рекомендуется вариант работы именно с этими растениями.

Мультиплицированные побеги далее укореняли. Для этого их выдерживали в стерильном растворе ИМК в кон

центрации 50 мг/л в течение 24 часов, затем переводили на агаризованную питательную среду, содержащую 0.5

мг/л ИМК, процесс ризогенеза происходил в течение 3-4-х недель.

Реализация морфогенных потенций термопсиса в культуре in vitro в определенной степени зависела от возра

стного состояния экспланта и гормонального состава питательной среды.

Таким образом, исследования показали, что термопсис ланцетовидный является отзывчивым объектом для

культивирования in vitro.

Синюха голубая — (Polemonium coeruleum L.) — многолетнее травянистое растение семейства Polemoniaceae.

Имеет евразийский ареал. В Башкортостане обитает почти во всех районах, но встречается небольшими куртин-

ками (Кучеров, 1971). Включена в «Красную книгу Башкирской АССР» (1984). Все части растения, в особенности

корни и корневища, содержат сапонины, благодаря чему обладают сильным отхаркивающим и седативным дей

ствием, применяется при заболеваниях легких и верхних дыхательных путей. Успокаивающее действие синюхи

превышает аналогичный эффект валерианы лекарственной в 8-10 раз. Заготовка корней не может проводится в

значительных количествах, так как это связано с длительным возобновлением особей. Повторная заготовка на од

ной территории возможна только через 5-7 лет. Спрос на синюху голубую намного превышает возможности заго

товок их в естественных местообитаниях и в культуре. Для этого вида нами разработан способ клонального мик

роразмножения in vitro.

Эксплантами являлись семена и почки надземного репродуктивного побега.

Стерилизацию семян проводили по схеме: в 3 %-ном растворе перекиси водорода выдерживали 5 мин, в 70

%-ном этаноле — 1 мин, 0.2 %-ном растворе диацида (этанолмеркурхлорида) — 15 мин. При подобранной схеме

стерилизации достигается 85-90 %-ная незараженность семян. Стерилизацию почек надземного репродуктивно

го побега проводили следующим образом: в 70 %-ном этаноле и 0.2 %-ном растворе азотнокислого серебра, что

дало возможность получить до 87.5 % неинфицированных эксплантов. С целью изучения морфогенетических по

тенций синюхи голубой в культуре in vitro изучали каллусообразующую и побегообразующую способность экс

плантов.

Для культивирования брались проростки, полученные из семян в асептических условиях, а также почки над

земных репродуктивных побегов.

Для изучения способности эксплантов к каллусогенезу была взята модифицированная среда Мурасиге и Ску-

га с добавлением гормонов БАП, 2,4-Д, НУК и кинетина. Выявлено, что каллусообразование происходило в моло

дых тканях — на пластинках семядольных листьев и черешках, причем на черешках интенсивность каллусогенеза

выше. Значительное каллусообразование стимулировалось в присутствии в питательной среде комбинаций БАП

и 2,4-Д в соотношении 1:4 и БАП и НУК в соотношении 1:2.

Многократное увеличение ростовых побегов (методом микрочеренкования) проводили на растениях, достиг

ших разных возрастных состояний. Наибольший коэффициент мультипликации побегов — до 160 побегов на экс-

плант через месяц культивирования отмечался у растений виргинильного возрастного состояния. Сделан вывод,

что для эффективности размножения с целью получения максимального числа побегов в короткие сроки реко

мендуется использовать прегенеративные виргинильные растения.

Размноженные побеги легко укореняли на средах с низкими концентрациями ИМК и ИУК от 0.1 до 0.5 мг/л, ри-

зогенез наблюдался через две недели культивирования. Растения-регенеранты, имеющие хорошо сформирован

ную корневую систему, высаживали в почвенный субстрат (дерновая почва-вермикулит в соотношении 1:1). Вы

саженные регенеранты помещали в климатокамеру с высокой влажностью воздуха (85-90 %), где они проходили

акклиматизацию. 100 %-ная жизнеспособность синюхи голубой была достигнута в вермикулите. Адаптированные

растения через месяц выращивания пересаживали в открытый грунт. На территории Ботанического сада создан

экспозиционный участок, на котором произрастают растения-регенеранты синюхи голубой, изучается сравни

тельный онтогенез регенерантов и контрольных растений, высаженных в грунт, проводятся морфометрические

измерения и фенологические наблюдения.

Культивирование изолированных тканей растений на питательных средах с последующей регенерацией из них

целых растений — новый подход к проблемам сохранения редких растений и реинтродукции их в природе.

СПИСОКЛИТЕРАТУРЫ

1. Абрамова Л.М. Эколого-биологический и фитоценотический анализ некоторых природных популяций редкого

лекарственного растения Thermopsis schischkinii в Башкирском Зауралье. Вопросы рационального использова

ния и охрана растений в республике Башкортостан

Уфа,

1998.

2. Бутенко Р.Г. Биология клеток высших растений in vitro и биотехнология на их основе. М., 1999.

Губанов И.А. Дикорастущие полезные растения СССР M.t 1976.

4. Дикорастущие лекарственные растения Башкирии. Уфа, 1971.

104

Научная эле тронная библиотека ЦНСХБ