71 / 540
П1+ Тг9 - почва, содержащая ОСВ и Trichoderma harzianum в концентрации
109 КОЕ на 1 г/иочвы.
П2+ Тг9 - почва, содержащая ОСВ и Trichoderma harzianum в концентра
ции 109 КОЕ на 1 г/почвы.
Для приготовления водной вытяжки 1 г воздушно-сухой почвы экстрагиро
вали 10 мл дистиллированной воды в течение 12 часов при комнатной темпера
туре. Стерилизацию проб проводили путем фильтрации через стерильные мем
бранные фильтры Synpor.
Токсичность по отношению к микроорганизмам
Токсичность почвенного образца оценивали по степени выживаемости (%),
определяемой как отношение числа колоний в варианте с исследуемой вытяж
кой к числу колоний в контрольном варианте.
Тест Эймса
В работе использовали ауксотрофный по гистидину тестерный штамм
Salmonella typhimurium: ТА 100 (his G46 ,rfa ,uvr\ bio', pKMIOl) полученный из
Института по биологическим испытаниям химических соединений (г. Купавна).
Штамм ТА 100 регистрирует мутации типа замены пар оснований. Эксперименты
проводили согласно Maron and Ames [1] в модификации Фонштейна с соавт.[2]
Определение свободного гистидина в образцах методом тонкослойной
хроматографии
Количество гистидина определяли методом тонкослойной хроматографии
(ТСХ). Доза гистидина, необходимая для удвоения ревертантов, равна
150 нмоль/чашку (232 мкг/мл) [3].
Результаты и обсуждение
Исследуемые почвенные вытяжки не проявили сильной токсичности по
отношению к тестерным микроорганизмам. Угнетение штамма микроорганиз
мов на 13 % обнаружено только в варианте с внесением Trichoderma в концен
трации 109 КОЕ /1 г чистой почвы. Подобные результаты были получены при
изучении токсических свойств водных вытяжек черноземных почв после интро
дукции в них спор гриба и его развития. Показано, что биопрепарат Trichoderma
harzianum в концентрации 109 КОЕ на 1 г чистой почвы ингибирует рост тестер-
ного штамма микроорганизмов на 25%.
По данным многих авторов известно, что Trichoderma harzianum выделяет
68
Научная электронная библиотека ЦНСХБ