Table of Contents Table of Contents
Previous Page  43 / 204 Next Page
Information
Show Menu
Previous Page 43 / 204 Next Page
Page Background

УДК 612.616.981.51

Индикация антигена-вируса чумы свиней

методом ИФА

В. Т. Сакович, А. С. Ястребов,

А. П. Лысенко, В. М. Клюкина

Белорусский НИИ экспериментальной ветеринарии

им

.

С.Н Вышелесского, г. Минск,

Всероссийский научно-исследовательский

и технологический институт биологической

промышленностиг. Щелково

Нашей задачей было с помощью иммуноферментного

анализа (ИФА) провести индикацию антигена-вируса чумы

свиней в лабораторных условиях.

В качестве антительного компонента набора диагностикума

использовали препараты антител к вирусу чумы свиней, полу­

ченные из 450 мл сыворотки крови от больных и переболевших

чумой свиней и 250 мл от здоровых животных. Сыворотки осаж­

дали сернокислым аммонием с последующей очисткой методом

аффинной хроматографии и концентрировали с помощью мем­

бран отечественного производства УАМ-600. Активность препа­

рата в ИФА (антигенный вариант) составила 8,0—8,5 лог2.

В качестве положительного антигена вируса чумы свиней

использовали культуральную вируссодержащую жидкость при

репродукции вакцинного вируса чумы свиней или штамма

“Alfort/187” вируса чумы, выращенного на перевиваемой куль­

туре клеток РК-15. Полученную жидкость обрабатывали ульт­

развуком и концентрировали с помощью ПЭГ-6000. Активность

вируса составила 4,25—4,51g ККИД50/мл.

Оптимальное разведение пероксидазного конъюгата со

специфическими противочумными антителами составило 1:250.

Для индикации антигена-вируса чумы использовали куль­

туральные жидкости, содержащие штамм “Alfort/187” вируса

чумы в различных разведениях и контрольные жидкости, со­

держащие другие возбудители (ТПС, ротавирус, энтеровирус)

и не содержащие вирус жидкости. При постановке ИФА полу­

чены положительные результаты с пробами, содержащих анти­

ген-вируса чумы в титре 3—5лог2

и

отрицательные результаты в

контрольных пробах. Всего исследовано 100 проб материала.

Достоверность полученных результатов в ИФА подтвер­

ждена исследованием материала в реакции иммунофлуорес-

41

Научная электр нная б блиотека ЦНСХБ