УДК 612.616.981.51
Индикация антигена-вируса чумы свиней
методом ИФА
В. Т. Сакович, А. С. Ястребов,
А. П. Лысенко, В. М. Клюкина
Белорусский НИИ экспериментальной ветеринарии
им
.
С.Н Вышелесского, г. Минск,
Всероссийский научно-исследовательский
и технологический институт биологической
промышленностиг. Щелково
Нашей задачей было с помощью иммуноферментного
анализа (ИФА) провести индикацию антигена-вируса чумы
свиней в лабораторных условиях.
В качестве антительного компонента набора диагностикума
использовали препараты антител к вирусу чумы свиней, полу
ченные из 450 мл сыворотки крови от больных и переболевших
чумой свиней и 250 мл от здоровых животных. Сыворотки осаж
дали сернокислым аммонием с последующей очисткой методом
аффинной хроматографии и концентрировали с помощью мем
бран отечественного производства УАМ-600. Активность препа
рата в ИФА (антигенный вариант) составила 8,0—8,5 лог2.
В качестве положительного антигена вируса чумы свиней
использовали культуральную вируссодержащую жидкость при
репродукции вакцинного вируса чумы свиней или штамма
“Alfort/187” вируса чумы, выращенного на перевиваемой куль
туре клеток РК-15. Полученную жидкость обрабатывали ульт
развуком и концентрировали с помощью ПЭГ-6000. Активность
вируса составила 4,25—4,51g ККИД50/мл.
Оптимальное разведение пероксидазного конъюгата со
специфическими противочумными антителами составило 1:250.
Для индикации антигена-вируса чумы использовали куль
туральные жидкости, содержащие штамм “Alfort/187” вируса
чумы в различных разведениях и контрольные жидкости, со
держащие другие возбудители (ТПС, ротавирус, энтеровирус)
и не содержащие вирус жидкости. При постановке ИФА полу
чены положительные результаты с пробами, содержащих анти
ген-вируса чумы в титре 3—5лог2
и
отрицательные результаты в
контрольных пробах. Всего исследовано 100 проб материала.
Достоверность полученных результатов в ИФА подтвер
ждена исследованием материала в реакции иммунофлуорес-
41
Научная электр нная б блиотека ЦНСХБ