ЭлБиб

163

Том XXXXVI 2016

этапа стратификации происходит (при необходимости) доразвитие зародыша

и снимается покой корневой меристемы. Низкие положительные температуры

необходимыдля снятияфизиологическогомеханизма торможенияпрорастания

и активации работы апикальной меристемы побега.

Применение семенной культуры или культуры эмбрионов

in vitro

позволяет

сократить сроки получения сеянцев с 4-7 месяцев до 2-4. Использование

семенной культуры пионов группы

suffruticosa

оказалась неэффективным,

поскольку при длительном культивировании семян в питательной среде

происходит накопление веществ фенольной природы, которые ингибируют

клеточные деления в развивающемся зародыше, что приводит к снижению

его жизнеспособности и впоследствии к гибели [4].

Выделение из семян зародыша и инкубация его на минеральных

питательных средах с добавлением различных растительных гормонов

позволяет получать проростки даже в том случае, когда в природных условиях

развития зародыша по разным причинам не произошло. При этом условия

формирования проростков в культуре

in vitro

видо- и сорто-специфичны и

требуют корректировки в каждом конкретном случае.

В работе использовали семена, полученные в результате свободного

опыления

suffruticosa

сорта ‘Ирина’. Зрелые семена собирали с

растений, проводили поверхностную стерилизацию согласно следующей

процедуре: семена промывали в 1% растворе Triton X-100 при постоянном

перемешивании (на магнитной мешалке) 20 минут, после чего замачивали

в 0,2% растворе препарата «Фундазол» на 30 минут, потом переносили в

3% раствор препарата «Лизоформин 3000», где выдерживали 20 минут.

По истечении времени стерилизации семена промывали тремя сменами

стерильной дистиллированной воды и помещали на твердую агаризованную

среду без дополнительных компонентов.

После набухания через 5 дней из семян выделяли зародыши и помещали

их на питательную среду МС с добавлением 0,1 и 0,5 мг/л гибберелловой

кислоты (ГК) и 30 г/л сахарозы. Культивирование при +22 °С и стандартном

фотопериоде (16 часов день/8 ночь) продолжалось до того момента, когда

активный рост корня заканчивался, при этом дальнейшего визуального

развития экспланта не происходило. На этом этапе 2/3 эксплантов перемещали

на +4 °С и выдерживали при указанной температуре в течение 5 и 7 недель,

после чего экспланты перемещали в исходные условия. Оставшуюся треть

оставляли в исходных условиях. Всего на твердую агаризованную среду было

помещено 60 семян, из которых были выделены зародыши. На каждый тип

среды помещали по 30 зародышей.

В результате проделанной работы было установлено, что семена сорта

‘Ирина’, которые формируются в результате свободного переопыления,

содержат зародыш, состоящий из двух семядолей и зародышевого корешка.

Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека