ЭлБиб

Ñàäîâîäñòâî è âèíîãðàäàðñòâî, ¹ 6, 2011

Ñåëåêöèÿ è ñîðòîèñïûòàíèå

Agrobacterium rhizogenes

, вирус мозаики цветной

капусты), а также при прямом внесении ДНК в

изолированные растительные клетки и протопла-

сты (генетическая трасфекция). Однако наиболее

простым и эффективным способом введения ге-

нов в растения остается инкубация растительных

клеток или высечек из листьев на питательной

среде в присутствии агробактерии, несущей плаз-

миду с необходимыми генами.

Поскольку официально выращивание в Рос-

сийской Федерации трансгенных растений не раз-

решено, в селекционной практике наиболее ши-

роко используется эмбриокультура.

В настоящее время получение на искусствен-

ных питательных средах сеянцев из зародышей,

завершивших свое развитие в материнских тка-

нях или близких к завершению, не представляет

особых сложностей. Однако для селекционеров

эти методы не всегда приемлемы, так как в слу-

чае проявления несовместимости при отдален-

ных скрещиваниях абортирование зародыша

происходит на самых ранних фазах развития и

получение гибридных сеянцев из них остается

проблематичным.

На развитие изолированных зародышей ран-

них фаз большое влияние оказывают регуляторы

роста и другие биологически активные вещества,

вводимые в питательную среду. Они могут сде-

лать культуру изолированных эмбрионов более

эффективной.

Используемые питательные среды позволя-

ют получить от каждого зародыша по несколько

идентичных копий, что повышает вероятность со-

хранения ценных генотипов и расширяет базу для

отбора. Развитие зародышей, изолированных в

ранних фазах, не требует прохождения покоя при

пониженных температурах, что упрощает про-

цесс выращивания и сокращает время получения

сеянцев. Это позволяет также в случаях несовме-

стимости эндосперма и зародыша при отдаленной

гибридизации своевременно, в ранних фазах изо-

лировать зародыш и получить гибридные экзем-

пляры. Разработанные приемы были с успехом

испытаны для получения растений от скрещива-

ний вишня х черешня, вишня х черемуха, слива х

алыча, слива х терн и других комбинаций.

Для повышения общего выхода растений в

культуре изолированных зародышей дополни-

тельно можно использовать семядоли, которые

отсекают от развивающихся эмбрионов на пер-

вых этапах культивирования

in vitro

и помещают

в питательную среду, где происходит индукция

адвентивных побегов. Такая методика позволяет

Рис. 4. Этапы регенерации растений земляники

в культуре изолированных пыльников

(рис. 4). Гаплоидное состояние способствует об-

наружению возникших мутаций, а возможность

дигаплоидизации ведет к созданию фертильных

диплоидных гомозиготных растений. В случае по-

явления гаметоклональных вариантов возможен

отбор форм с полезными признаками.

Рис. 3. Сеянцы груши, полученные

в ГНУ ВСТИСП Россельхозакадемии

с геном карликовости

Культура пыльников и пыльцы дает возмож-

ность получить сомаклональные варианты, осо-

бенно если процессам органогенеза предшество-

вало образование каллусной ткани.

Прогресс в молекулярной биологии растений

привел к возможности получения трансгенных

растений. Разработаны различные методы вве-

дения в клетки небольшой части генома, групп

генов или отдельных генов растений и бактерий.

Эти методы основываются на использовании

специфических векторов, встречающихся в рас-

тительных патогенах (

Agrobacterium tumefaciens,

Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека