NED373392NED

240 Труды Федерального центра охраны здоровья животных. Том X Кроме выживаемости при субнормальных (4–6 ºС) темпе- ратурах нами была изучена способность неадгезированных (че- рез 24 и 48 ч) первично трипсинизированных клеток седимен- тироваться на новую культуральную поверхность и формиро- вать монослой. Результаты представлены в таблице. Таблица Динамика формирования монослоя, выращенного из надосадка «Возраст» надосадка Концентрация, тыс./мл Уровень адгезии, % Сроки формирова- ния монослоя, сут. 0 ч, основной посев 200 30–40 5 Посев надосадка через 24 ч 100 5–10 6–7 Посев надосадка через 48 ч 50 4–5 8–10 В результате проведённых исследований было выявлено, что из 200 тыс. клеток/мл адгезируется 30-40 % живых клеток, кото- рые после смены среды разрастаются до монослоя. В случае если смену среды не производят, оставшаяся часть клеток не способна к адгезии и через 3–4 сут. разрушается. Но в тоже время после переноса надосадка на новую культуральную поверхность (через 24 и 48 ч), адгезия оставшихся клеток происходит активно, и по- сле смены среды формируется полноценный монослой. Морфо- логия монослоя выросших клеток изначального посева (0 ч) и второй генерации (24 ч) обладает одинаковыми структурными элементами. Первая генерация клеток характеризуется большей плотностью и продуктивностью. Как видно из таблицы клетки, полученные из второго надосадка, через 48 ч также адгезируются и образуют монослой после смены среды через 10 сут. Феномен повторной и последующей адгезии первично трипсинизированных клеток можно объяснить следующим об- разом. Так, при трипсинизации происходит разрушение не только межклеточного матрикса, но и клеточных мембран, в результате чего образуется большое количество детрита, состо- ящего из клеточных мембран разной молекулярной массы, ко- торый нейтрализует заряд на культуральной поверхности. При переносе надосадка в новую систему культивирования (пласти- ковый флакон), оставшиеся жизнеспособные клетки реализуют Электронная Н учная СельскоХозяйственная Библиотека