NED373392NED

226 Труды Федерального центра охраны здоровья животных. Том X ду заменяют на поддерживающую в те же сроки, что и для фла- конов с зараженными культурами клеток. Учет цитопатического действия (ЦПД) вируса проводят че- рез 3 сут. – для ВГИ, на 4–5 сут. – для ВБМ и на 5 сут. инкуби- рования для ВГК. По истечении сроков инкубирования клеточные культуры окрашивают амидовым черным, для чего из флаконов удаляют поддерживающую среду и заливают по 8,0 или 0,25 см 3 , соот- ветственно, 0,1 % раствора амидового черного, подогретого до 37  С. Флаконы укладывают на лоток так, чтобы краситель по- крывал весь монослой клеток, и оставляют на 2–3 мин; затем краситель удаляют, а окрашенный монослой промывают 0,5 % раствором уксусной кислоты. После этого подсчитывают коли- чество фокусов (ЦПД вируса) в каждом флаконе и определяют среднее арифметическое значение числа фокусов для каждого разведения. При расчете титра вируса используют одно разведение из двух, для которого среднее число фокусов оказалось равным не менее 10 и не более 100. Титр вируса определяют по формуле: , /)10(2 Р А Т   где Т – титр вируса в фокусообразующих единицах (ФОЕ) в 1,0 см 3 ; А – среднее количество фокусов во флаконе; 2(10) – коэффициент пересчета на 1,0 см 3 ; Р – разведение вируса. Титр штаммов главного и рабочего посевного материала должен быть не ниже 1,0×10 5 ФОЕ/см 3 для ВБМ, ВГИ; и 1,0× 10 4 ФОЕ/см 3 – для ВГК. В незараженных контрольных культурах клеток КФ должны отсутствовать признаки дегенеративных изменений культуры [6] . Контроль на иммуногенность. Иммуногенность матровых расплодок проверяют в острых опытах один раз в 5 лет. С этой целью суточных цыплят иммунизируют производственными штаммами «ВНИИЗЖ» ВГИ в дозе 1000 ФОЕ/0,2 см 3 и «3004» ВБМ – 2000 ФОЕ/0,2 см 3 . Через 14 суток цыплят заражают виру- лентным штаммом ВБМ в виде цитрированной крови. С этой це- лью цыплятам вводят вируссодержащий материал внутримы- Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека