NED373392NED

Вопросы биотехнологии 225 – термостат с температурой нагрева 37,5±0,5°С (любой с указанными характеристиками); – центрифугу со скоростью вращения ротора не менее 1000 g; – мешалку магнитную с подогревом; – СПФ-эмбрионы кур 9–10-суточного возраста; – среды культуральные: ростовую (30 % ГЛАХ + 30 % Иг- ла + 30 % среды 199 +10 % сыворотки крови крупного рогатого скота) и поддерживающую (38 % ГЛАХ + 30 % Игла + 30 % сре- ды 199 + 2 % сыворотки крови крупного рогатого скота); – раствор Хенкса; – раствор трипсина 0,25 %; – кислоту уксусную 0,5 %; – воду дистиллированную; – амидовый чёрный МРТУ 6-09-357, 0,1 %-ный раствор в 0,5 % растворе уксусной кислоты; – пипетки стеклянные мерные; – пробирки стеклянные; – флаконы пластиковые для культур клеток с ростовой по- верхностью 25 см 2 . Инфекционную активность главного и рабочего посевного материала штаммов ВБМ определяют путем титрования препа- рата в культуре клеток СПФ-эмбрионов кур. Монослойную культуру клеток ФЭК готовят методом трипсинизации 9–10-суточных СПФ-эмбрионов кур, с последу- ющим выращиванием клеток на поверхности флаконов в тече- ние 24–36 ч. На питательной среде готовят десятикратные разведения вируса, для матриксных штаммов ВГИ и ВБМ от 10 -1 до 10 -4 и от 10 -1 до 10 -3 – для штамма ВГК. Каждое разведение матриксного штамма вируса тщательно пипетируют, не допуская образова- ния пены в пробирке. Во флаконах с 24-часовой культурой КФ ростовую питательную среду заменяют на поддерживающую и вносят по 0,5 см 3 каждого разведения вируса. На каждое разве- дение штаммов вируса БМ используют по 4 флакона с первич- ной культурой клеток КФ. Флаконы с инокулированной культу- рой клеток выдерживают в термостате в течение 5 сут. В качестве контроля при титровании используют 4 флакона с незараженной культурой клеток КФ, в которых ростовую сре- Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека