NED373392NED

Вопросы биотехнологии 217 Результаты и обсуждение Приготовление главного посевного материала (Master seed) и рабочего материала (Working seed). Работу по приго- товлению Master seed штаммов вируса БМ (штаммы «Влади- мир», «3004» и «SB-1») проводят специалисты профильного подразделения ФГБУ «ВНИИЗЖ» в соответствии с настоящим СТО. К работе с вирусным материалом допускается ограничен- ное число специалистов. Контроль штаммов проводится с уча- стием представителей ФГБУ « ВГНКИ». Процесс получения системы посевных материалов включа- ет в себя следующие этапы: – освежение исходного посевного материала (OV) ВБМ; – приготовление главного посевного материала (MS); – заражение первичной культуры клеток КФ; – инкубирование при 37,5 ºС; – сбор инфицированных клеток; – промежуточный контроль; – расфасовка главного посевного материала (Master seed) – приготовление рабочего посевного материала (Working seed); – заражение первичной культуры клеток КФ; – инкубирование; – сбор инфицированных клеток; – фасовка рабочего посевного материала (WS); – контроль готовой продукции. Освежение штаммов главного посевного материала ВБМ . Освежение вирусов проводят двумя последовательными пасса- жами. Ампулы с исходным вирусом болезни Марека (Original virus) достают из жидкого азота и немедленно помещают в воду с температурой 27±1 ºС до полного размораживания. Затем ам- пулы обрабатывают 3 % раствором перекиси водорода, фламби- руют и вскрывают. Для приготовления главного посевного материала (MS) в сосуды с 48-часовой культурой клеток КФ вносят вируссодер- жащий материал из ампул. Количество ампул с вирусом, ис- пользуемых для заражения, определяют исходя из исходного титра (OV) расплодки штаммов ВБМ. Содержимое ампул объ- Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека