NED373390NED

198 Актуальные вопросы болезней птиц и других видов животных Титрование вируса. Титр вируса в каждой группе ЭЭЖ определяли заражением 11-суточных КЭ последовательными 10-кратными разве- дениями материала и в реакции гемагглютинации. Инфекционный титр (ЭИД 50 ) рассчитывали по методу Кербера в интерпретации Ашмарина. Куриные эмбрионы. Для культивирования ВГП использовали 9-12-су- точные эмбрионы СПФ-кур фирмы Hy-Vac (США), которые инкубирова- ли при температуре 37,5±0,2°С и влажности 60%. Растворы и реактивы. При получении и исследовании вируссодер- жащих суспензий пользовались стерильным физиологическим буферным раствором (pH = 7,02-7,2). Для обработки яиц перед заражением и перед вскрытием использовали 70% этиловый спирт. Результаты и обсуждение Перед нами была поставлена задача – оптимизировать следующие условия культивирования ВГП штамм «A/duck/Primorie/2621/01 (H5N2)»: возраст эмбрионов, заражающую дозу штамма, величину накопления ви- руса в ЭЭЖ и объем ЭЭЖ – для дальнейшего его практического использо- вания в изготовлении экспериментального образца вакцины. На первом этапе исследования нами была проведена работа по оцен- ке патогенности ВГП штамм «A/duck/Primorie/2621/01 (H5N2)». Для этого было сформировано 3 опытных и одна контрольная группы (по 15 эмбрионов в каждой). Эмбрионы опытных групп заражали исследуемым штаммом в дозе 100, 1000 и 10000 ЭИД 50 , инкубировали в течение 96 ч с овоскопированием через каждые 24 ч и отбором павших эмбрионов. Ре- зультаты биопробы представлены в табл. 1. Таблица 1 Протокол учета гибели эмбрионов кур Заражающая доза, ЭИД 50 Специфическая гибель КЭ в различные сроки 24 ч 48 ч 72 ч 96 ч 10000 0/15* 0/15 4/15 15/15 1000 0/15 0/15 0/15 13/15 100 0/15 0/15 0/15 12/15 * – в числителе – количество погибших эмбрионов; в знаменателе – общее количе- ство зараженных данной дозой вируса эмбрионов Было установлено, что ВГП штамм «A/duck/Primorie/2621/01 (H5N2)» является слабопатогенным для КЭ, т.к. даже при инфицировании эмбрио- нов в дозе 10000 ЭИД 50 через 72 ч погибло только 26,6% эмбрионов. При Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека