NED373390NED

Актуальные вопросы болезней птиц и других видов животных 197 ВГП для эмбрионов кур, являющихся основной системой для культи- вирования ВГП (2). В настоящее время специфическая профилактика ГП в РФ основана на применении инактивированных вакцин на основе высокопатогенного вируса ГП подтипа H5N1. Такие вакцины хорошо себя зарекомендовали во время эпизоотий ВПГП 2005-2007 гг. на территории различных субъ- ектов РФ. Для профилактики гриппа птиц в различных странах широко применяются инактивированные вакцины, изготовленные из штаммов аутогенных, циркулирующих в конкретном эпизоотическом очаге, или го- мологичных по H, но гетерогенных по N. Применение последних позво- ляет проводить дифференциацию вакцинированной птицы и птицы, зара- женной «полевым» вирусом, что является важным моментом в развитии стратегии по борьбе с ВГП. Цель данной работы – подобрать оптимальные условия культивиро- вания ВГП штамм «A/duck/Primorie/2621/01 (H5N2)» в куриных эмбри- онах для изготовления вакцины, а также сравнить с таковыми условия культивирования ВГП, используемого в производстве (штамм ВНИИЗЖ №125-ДЕП «Новосибирский» вируса гриппа птиц типа А подтипа Н5N1). Согласно опубликованным данным, оптимальными параметрами куль- тивирования штамма «Новосибирский» вируса гриппа птиц типа А под- типа H5N1, позволяющими получать высокоактивный вируссодержащий материал, являются: заражающая доза – 87-127 ЭЛД 50 ; возраст куриных эмбрионов (КЭ), используемых для заражения – 11-13 сут; время инкуби- рования эмбрионов – 48 ч. Соблюдение указанных параметров позволяет получать вируссодержащую жидкость с титром инфекционной активно- сти 9,75±0,05 lg ЭЛД 50 /мл (4). Материалы и методы Штамм вируса. В работе был использован ВГП штамм «A/duck/Primorie/2621/01 (H5N2)», пятый пассаж. Культивирование вируса. Заражение эмбрионов производили в ал- лантоисную полость по стандартной методике (2). Вируссодержащий ма- териал вносили шприцом с тонкой короткой иглой в объёме 0,2 мл/эмбр. Культивирование ВГП проводили в 9-12-суточных куриных эмбрионах. Инкубацию зараженных эмбрионов проводили в течение 24 – 96 ч в тер- мостате при температуре 37,5±0,2°С. После 24 ч охлаждения при 2-6°С эмбрионы вскрывали, отбирали экстраэмбриональную жидкость (ЭЭЖ) в стеклянные флаконы. Освобождение ЭЭЖ от крупнодисперсных частиц проводили методом низкоскоростного центрифугирования. Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека