NED373390NED

Актуальные вопросы болезней птиц и других видов животных 187 Контакт вируса с клетками осуществляли в течение 1 ч. Далее в каждый сосуд заливали по 150 см 3 поддерживающей среды. Во 2-й группе после контакта вируса с клетками вместе с поддержи- вающей средой вносили полионы. Размножение вируса определяли по наличию ЦПД в зараженной культуре. На первом этапе размножения вируса происходило сглаживание характерного рисунка культуры клеток Vero, на втором этапе – клетки сливались и образовывали симпласты. На 24 и 48 ч культивирования ви- руссодержащую суспензию замораживали при температуре минус 40ºС. Через 24 ч содержимое сосудов оттаивали при комнатной температуре и, встряхивая, тщательно отбивали льдинками инфицированные клетки с внутренней поверхности сосудов. Вирусный материал проверяли на сте- рильность и определяли инфекционную активность титрованием в суточ- ной культуре клеток Vero. Результаты и обсуждение При цитологическом анализе опытов отмечено, что ДЕАЕ-декстран при постоянном присутствии в дозе 50 мкг/см 3 или контактном внесении обладал цитотоксическим действием. Это приводило к значительному увеличению межклеточных пространств в культуре клеток Vero, зерни- стости и вакуолизации цитоплазмы, появлению гигантских клеток, кото- рые отторгались от стекла, образуя на вторые сутки в монослое пустоты. В контрольной культуре и в дозах 30 и 40 мкг/см 3 подобных изменений не наблюдалось. Однако при обработке ДЕАЕ-декстраном в дозах 30 и 40 мкг/см 3 в инфицированной культуре клеток Vero ЦПД было четче, раз- вивалось раньше и более интенсивно на 24 ч после внесения вируса. Трипсин в дозах 20 и 30 мкг/см 3 не вызывал визуально деструктивных изменений клеток, ускорял срок наступления ЦПД на 6-7 ч. 1% раствор ДМСО, протаминсульфат в дозах 50 и 100 мкг/см 3 изме- нений в клетках не вызывали. Гепарин в дозе 30 ЕД/см 3 не оказывал токсического действия на клетки. Накопление МПВ птиц штамм «PV03-B» в культуре клеток Vero при постоянном присутствии и контактной обработке клеток полионами пред- ставлено в таблице. Из данных таблицы видно, что культивирование МПВ птиц в куль- туре клеток Vero при контактном введении или постоянном присутствии ДЕАЕ-декстрана в дозе 30 мкг/см 3 способствовало повышению инфекци- онной активности вируса на 1,0 lg, по сравнению с контролем, титр ви- Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека