ЭлБиб

ХРАНЕНИЕ И ПЕРЕРАБОТКА СЕЛЬХОЗСЫРЬЯ, № 6, 2012

×åëîâåê â ïðîöåññå ñâîåé æèçíåäåÿòåëüíîñòè èìå-

åò ïîñòîÿííûé êîíòàêò ñ ïëåñíåâûìè ãðèáàìè. Ïëåñ-

íåâûå ãðèáû åñòü â âåðõíèõ ñëîÿõ ïðåñíîé è ìîðñêîé

âîäû, íà ïîâåðõíîñòè ðàñòåíèé, â âîçäóõå, áîëüøå

âñåãî èõ ñîäåðæèòñÿ â ïî÷âå. Áëàãîäàðÿ ìèöåëèàëü-

íîìó ðîñòó è íàáîðó ãèäðîëèòè÷åñêèõ è îêèñëèòåëü-

íûõ ôåðìåíòîâ ïëåñíåâûå ãðèáû ó÷àñòâóþò â êðóãî-

âîðîòå îðãàíè÷åñêîãî ìàòåðèàëà â ïðèðîäå.

Ïëåñíåâûå ãðèáû — öåííûå ïðîäóöåíòû ïðèðîä-

íûõ áèîëîãè÷åñêèõ âåùåñòâ: àìèíîêèñëîò, íåíàñû-

ùåííûõ æèðíûõ êèñëîò, âèòàìèíîâ è âèòàìèíîïî-

äîáíûõ âåùåñòâ. Ïî àìèíîêèñëîòíîìó ñîñòàâó ãðèá-

íîé áåëîê íå óñòóïàåò áåëêó æèâîòíûõ. Ìèêðîñêîïè-

÷åñêèå ãðèáû ìîãóò áûòü èñïîëüçîâàíû â ðàçëè÷íûõ

îòðàñëÿõ — ïèùåâîé ïðîìûøëåííîñòè, ñåëüñêîì õî-

çÿéñòâå, çàùèòå îêðóæàþùåé ñðåäû, ìåäèöèíå [1].

Â ïîñëåäíèå ãîäû âñå áîëåå øèðîêîå ïðèìåíåíèå

ïðèîáðåòàþò ôåðìåíòíûå ïðåïàðàòû èç ãðèáîâ.

Ïðîòåàçû — ôåðìåíòû êëàññà ãèäðîëàç, ðàñùåïëÿ-

þùèå ïåïòèäíóþ ñâÿçü ìåæäó àìèíîêèñëîòàìè â

áåëêàõ. Îíè èãðàþò âàæíóþ ðîëü â ïðîöåññàõ ðåãó-

ëÿöèè ìíîæåñòâà áèîëîãè÷åñêèõ ïðîöåññîâ íà ðàç-

ëè÷íûõ óðîâíÿõ, íà÷èíàÿ îò ìîëåêóëÿðíîãî è çàêàí-

÷èâàÿ ìåæîðãàííûì. Â íàó÷íûõ èññëåäîâàíèÿõ îíè

ïðèìåíÿþòñÿ äëÿ èçó÷åíèÿ ïåðâè÷íîé ñòðóêòóðû

ïåïòèäîâ è áåëêîâ, ñïåöèôèêè è êèíåòèêè ðàçëè÷-

íûõ ðåàêöèé, à òàêæå ñòðîåíèÿ àêòèâíûõ öåíòðîâ.

Ñðåäè âíåêëåòî÷íûõ ïðîòåàç ìèêðîîðãàíèçìîâ îñî-

áåííî âûäåëÿþòñÿ ïðîòåîëèòè÷åñêèå ôåðìåíòû, êî-

òîðûå îáëàäàþò âûñîêîé àíòèêîàãóëÿòèâíîé è ôèá-

ðèíîëèòè÷åñêîé àêòèâíîñòüþ [2].

Ñ ïðèìåíåíèåì ãðèáíûõ ïðîòåàç ïîÿâèëàñü âîç-

ìîæíîñòü ðàçðàáîòàòü ðàçëè÷íûå ñïîñîáû ðåöèêëè-

çàöèè îòõîäîâ, ÷òî îáåðåãàåò îêðóæàþùóþ ñðåäó.

Âñëåäñòâèå âûñîêîé ôåðìåíòàòèâíîé àêòèâíîñòè

ïðè ðàçëîæåíèè ïðèðîäíûõ ñîåäèíåíèé ôåðìåíòû

ìèêðîîðãàíèçìîâ áîëåå ïðåäïî÷òèòåëüíû [3].

Ïîâûøåííûé èíòåðåñ ê ñåêðåòèðóåìûì ïðîòåî-

ëèòè÷åñêèì ôåðìåíòàì ãðèáîâ ñâÿçàí ñ èõ ó÷àñòèåì

â ðàçëè÷íûõ ôîðìàõ ïàòîãåíåçà. Îäíàêî ñòîèò îòìå-

òèòü, ÷òî â äàííîì ïðîöåññå ôóíêöèîíàëüíàÿ ðîëü

ïðîòåàç äî êîíöà íå âûÿâëåíà. Ñóùåñòâóåò ïðåäïî-

ëîæåíèå, ÷òî îíè ñïîñîáíû ó÷àñòâîâàòü â ïðîíèê-

íîâåíèè ïàòîãåíà âíóòðü îðãàíèçìà è îáåñïå÷èâàòü

åãî ïèòàíèå ñîâìåñòíî ñ äðóãèìè ôåðìåíòàìè. Ïî

âñåé âèäèìîñòè, ãðèáíûå ïðîòåàçû ïðèíèìàþò íå-

ïîñðåäñòâåííîå ó÷àñòèå â ïàòîãåíåçå ÷åðåç âçàèìî-

äåéñòâèå ñ áåëêàìè èëè äðóãèì ïðîäóêòîì ãåíà óñ-

òîé÷èâîñòè [4].

Öåëü äàííûõ èññëåäîâàíèé — èçó÷åíèå ïðîòåàçû,

ïîëó÷åííîé èç ïëåñíåâîãî ãðèáà

P. roqueforti

. Â çàäà-

÷ó âõîäèëè ïîëó÷åíèå è èññëåäîâàíèå N-êîíöåâîé

àìèíîêèñëîòíîé ïîñëåäîâàòåëüíîñòè ïðîòåàçû

ïëåñíåâîãî ãðèáà

P. roqueforti

, èññëåäîâàíèå ôèçèêî-

õèìè÷åñêèõ ñâîéñòâ ôåðìåíòà, åãî àêòèâíîñòè, òåì-

ïåðàòóðíîé ñòàáèëüíîñòè è ñóáñòðàòíîé ñïåöèôè÷-

íîñòè, à òàêæå èññëåäîâàíèå âëèÿíèÿ áåëêîâûõ èí-

ãèáèòîðîâ è óñòàíîâëåíèå êèíåòè÷åñêèõ ïàðàìåòðîâ

ãèäðîëèçà ñóáñòðàòîâ.

Â êà÷åñòâå îáúåêòà èññëåäîâàíèé áûëà âûáðàíà

ïðîòåàçà ïëåñíåâîãî ãðèáà

P. roqueforti

. Ïðèìåíÿ-

ëè ìåòîä ñåêâåíèðîâàíèÿ; àêòèâíîñòü ïðîòåîëèòè-

÷åñêîãî ôåðìåíòà îïðåäåëÿëè ñïåêòðîôîòîìåòðè-

÷åñêè ïðè 290 íì íà ñïåêòðîôîòîìåòðå DU 800

(Beckman Coulter).

Ñ ïîìîùüþ ìåòîäà ñåêâåíèðîâàíèÿ áûëà ïîëó÷å-

íà N-êîíöåâàÿ àìèíîêèñëîòíàÿ ïîñëåäîâàòåëüíîñòü

ïðîòåàç ïëåñíåâîãî ãðèáà

P. roqueforti

. Ïåðâè÷íàÿ

ñòðóêòóðà äàííîé ïðîòåàçû âûãëÿäèò ñëåäóþùèì

îáðàçîì:

1 mwfsqvtva ltcfsaiasa aavrqeppqg ftvnqvqkav pgtrtvnlpg

lyanalvkyg;

61 atvpatvhaa avsgsaittp eaddveyltp vtigsstlnl dfdtgsadlw

vfsseltssq;

121 qsghdvynvg slgtklsgas wsisygdgss asgdvykdtv tvg-

gvkatgq aveaakkiss;

181 qflqdknndg llgmafssin tvsptpqktf fdtvksslge plfavtlqgt

grpwhlrfgy;

241 idsdkytgtl ayadvddsdg fwsftadsyk igtgaagksi tgiadtgt-

tl llldssivtg;

301 llqegypgsq nsssaggyif pcsatlpdft vtingydavv pgkyin-

fapv stgssscygg;

361 iqsnsgigfs ifgdiflksq yvvfdsegpr lgfaaqa.

Ïîëó÷åííàÿ ïåðâè÷íàÿ ñòðóêòóðà ïîêàçûâàåò,

÷òî ïðîòåàçà ïëåñíåâîãî ãðèáà

P. roqueforti

— îòäåëü-

íàÿ ýâîëþöèîííàÿ âåòâü õèìîòðèïñèíîïîäîáíûõ

ИССЛЕДОВАНИЕ СВОЙСТВ ВЕЩЕСТВ И ПРОДУКЦИИ АПК

УДК 579.22

Исследование протеазы плеснево"о "риба

Penicillium roqueforti

Î.Â.ØÀÁÀÍÎÂÀ

ÎÎÎ «Ôèðìà «Êàëîðèÿ», Êðàñíîäàðñêèé êðàé

Êàíä. òåõí. íàóê, äîöåíò Î.Î.ÁÀÁÈ×; êàíä. òåõí. íàóê, äîöåíò Î.Â.ÊÎÇËÎÂÀ;

êàíä. òåõí. íàóê È.Ñ.ÐÀÇÓÌÍÈÊÎÂÀ

Êåìåðîâñêèé òåõíîëîãè÷åñêèé èíñòèòóò ïèùåâîé ïðîìûøëåííîñòè

Êëþ÷åâûå ñëîâà:

ãèäðîëèç, èíãèáèòîð, ïðîòåàçà,

ñóáñòðàòíàÿ ñïåöèôè÷íîñòü, ôèçèêî-õèìè÷åñêèå

ñâîéñòâà.

Keywords:

hydrolysis, inhibitor, protease, substrate speci-

ficity, physical and chemical properties.

Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека