ЭлБиб

41 / 540

УЛЬТРАСТРУКТУРЛ КЛЕТОК ПРОРОСТКОВ АМАРАНТА ПОСЛЕ
ВОЗДЕЙСТВИЯ ЦИТОКИНИНАМИ
10, И.Пашкина, И,Л.Гетман, Г.А.Романов. ■
Институт физиологин растений РАН, Москва 127276, Ботаническая, 35,
факс (095) 9778018, E-mail:
Для исследования молекулярного механизма действия цитокинина
(ЦК) предложена модельная система с использованием-проростков ама­
ранта. В этой системе уже через несколько часов воздействия ЦК in vivo
проявляется четкий физиологический ответ (образование пигмента ама-
рантнна), который легко измерять количественно.
Методика. Исследование проводили на семядолях 3-дневных проро­
стков амаранта, у которых экзогенные цитокннины (ЦК) вызывают син­
тез красного пигмента бетацианина уже через 4 часа после воздействия.
Бета цианин определяли на спектрофотометре (до того семядоли трижды
замораживали и о паивали в 0,1N НС1). Оптическую плотность измеря­
ли при длине волш»! 540 им. Цитологические наблюдения велись парал­
лельно с биохимическим анализом накопления бетацианина. Для элек-
трономикросконпчсскогп изучения фиксировали кусочки тканей разме­
ром 1 мм в растворах 4° о иараформальдегида и 2,5% глютарового альде­
гида, приготовленных на 0,1М какодилатном буфере, pH 7 ,2-7,4 от 3 до
16 часов при 4° С. После трехкратной промывки буфером образцы
постфикемровали и !% четьтрехокиси осмия в течение 1 часа при ком­
натной' температуре, обезвоживали в этаноле и окиси пропилена, пропи­
тывали и заливали аэпоксидную смолу Эпон 812. Ультратонкие срезы
получали на улыргпоме 1 КВ 8801 А (Швеция), контрастировали р-ми
1% уранилацетагл и цитрата свинца. Наблюдение и съемку прово­
дили на трансмиссионном микроскопе JEM-100C (JEOL, Япония).
28
Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека