представителем из семейства TL-белков, обладающим сладким вкусом.
Он вызывает ощущение сладкого вкуса (он в несколько тысяч раз сла
ще сахарозы) и поэтому также может использоваться для модификации
вкуса плодов. Это особенно актуально для российских сортов ягодных
растений, обладающих достаточной зимостойкостью, но относительно
невысокими вкусовыми характеристиками.
Методом агробактериальной трансформации земляники садовой
получено 15 независимых трансгенных линий сорта Selekta. Молеку
лярно-биологический анализ этих линий показал присутствие гена
тауматина в 14 линиях; рекомбинантный белок тауматин аккумулиро
вался во всех линиях. Трансформационные эксперименты и молеку
лярно-биологические анализы проводились на базе Станции искусст
венного климата «Биотрон» Филиала Института биоорганической хи
мии им.М.М.Шемякина и Ю.А Овчинникова РАН.
Для проведения полевых испытаний использовались все 15 гене-
тически-модифицированных линий сорта Selekta. Испытания проводи
лись в течение 2003-2005 годов, на территории сертифицированного
полигона на базе карантинного питомника ВНИИСПК (г. Орел).
Органолептический анализ плодов генетически модифицирован
ных (ГМ) форм земляники садовой. В нашей работе вкусовые качества
плодов трансгенных растений, а именно - сладость мякоти, оценива
лась по разработанной нами методике с учетом опыта известных науч
ных школ (Daubeny, 1996; Paterson и др., 1993; Brennan и др., 1997; Mo
rel и др., 1999). В связи с тем, что тауматин помимо суперсладкого вку
са характеризуется еще и специфическим свойством послевкусия, для
корректного сравнения трансгенных линий необходимо было чередо
вать опытные образцы с контрольными. В качестве отрицательного
контроля выступали не только плоды нетрансгенных растений, но и
растений без экспрессии тауматина. Более того, чтобы исключить
влияние степени спелости плода на результат анализа, для каждого
клона выбиралось по четыре плода. Затем отдельно оценивался вкус
каждого плода, после чего выводилась средняя оценка сладости для
данного трансгенного клона.
Органолептический анализ 13 линий без нежелательных феноти
пических отклонений и с экспрессией тауматина II (за исключением
одной линии, содержащей только ген селективного маркера) позволил
выбрать пять линий (табл. 1) с детектируемыми вкусовыми измене
ниями (усилением сладости, появлением новых вкусовых оттенков). На
рисунке 1 приведены результаты данного анализа.
Анализ влияния экспрессии тауматина II на устойчивость земля
ники садовой к
Botrvtis cinerea
. Для изучения влияния тауматина на
устойчивость тканей трансгенных растений земляники садовой ис
пользовалась методика G.Peng и J.C. Sutton (1991) с некоторыми изме
нениями (см. более подробное описание в главе «Объекты и методы
исследования»). В отличие от стандартной методики, инкубация ино-
328
Электронная Научная СельскоХозяйственная Б блиотека