ЭлБиб

ВТОРИЧНЫЙ СОМАТИЧЕСКИЙ ЭМБРИОГЕНЕЗ

ИЗ НЕЗРЕЛЫХ ЗИГОТИЧЕСКИХ ЗАРОДЫШЕЙ ПОДСОЛНЕЧНИКА

Т. С. Антонова

Всесиюзныи н

учно-исслеДовател ьский

институт маслинных культур (г. Краснодар)

Соматический эмбриогенез у подсолнечника как основной путь

регенерации целых растений из клеток в последнее время — пред

мет пристального внимания многих исследователей.’ Получен пря

мой и непрямой соматический эмбриогенез из незрелых зиготн-

ческнх зародышей (Finer, 1987; Антоновка и др., 1988, 1990; Freys-

sinet et al., 1988) и из гипокотилей проростков (Paterson, Everett,

1985; Everett et

a l,

1988; Wilhox et al., 1988). Описано формирова

ние эмбриоидов из протопластов гипокотилей (Moyne et al., 1988;

Dupuis et al., 1988). Однако при достаточно большом числе закла

дывающихся эмбриоидов выход нормально развитых растений-реге

нерантов обычно невелик. И это составляет отдельную, пока не

решенную проблему. Так же, как и у других культур, у соматиче

ских зародышей подсолнечника наблюдается широкий спектр ано

малий в развитии. Увеличить выход нормально развитых регене

рантов возможно путем индукции вторичных соматических заро

дышей из первичных. У вторичных эмбриоидов развитие в целые

растения происходит значительно успешнее. Для индукции вторич

ного эмбриоидогенеза использовали 4 инбредные линии, получен

ные из растений-регенерантов генотипа 2227 коллекции ВИР и

улучшенные нами по признаку регенерационной способности. В ка

честве эксплантов использовали 4—5-дневные зиготические заро

дыши (размером 2—3 мм). После общепринятой процедуры стери

лизации вычлененные из плодовой оболочки зародыши культиви

ровали в течение 5 дней на индукционной среде с минеральной

основой и витаминами по Bs, 4 г/л мезоинознта, 2 г/л гидролизата

казеина, 2 мг/л 2,4-Д, 120 г/л сахарозы, 7 г/л агара, pH 5,8 в темно

те при 25°С. Далее экспланты переносили на регенерационную сре

ду с минеральной основой и витаминами по М—С, 100 мг/л ме-

зоинозпта, 0,2 мг/л ИУК, 30 г/л сахарозы, 7 г/л агара, pH 5,8 и вы

держивали на свету при 16-часовом фотопериоде. В течение 8—10

дней на этой среде из клеток мезофилла и эпидермиса формирова

лись первичные эмбриоиды. Для получения из них вторичных эм

бриоидов первичные в стадии Торпедо и котиледонной переносили

па свежую среду, отличающуюся от регенерационной отсутствием

ИУК, наличием 0,2 мг/л 6-БАП и увеличенным содержанием саха

розы до 120 г/л. Помещали в темноту и инкубировали при 25°С

в течение 3-х недель. Вторичные эмбриоиды появлялись на первич

ных в количестве от одного до трех-пяти. При переносе на эту среду

стадий раннего или позднего сердечка вторичные эмбриоиды по

являлись не всегда, и, как правило, из одного первичного закла

дывался лишь один вторичный. Это отмечено для всех четырех

Электронная Науч ая СельскоХозяйственная Библиотека