NED360717NED

УДК 633.2./632.4 СПОСОБ ПОВЫШ ЕНИЯ НАДЕЖНОСТИ RAPD-MAPKEPOB ДЛЯ СЕЛЕКЦИИ КОРМОВЫХ КУЛЬТУР И. А. Клименко, кандидат сельскохозяйственных наук ФГБНУ «ВНИИ кормов им. В. Р. Вильямса», г. Лобня Московской области, Россия, iaklimenko@mail.ru Предложен способ повышения надежности RAPD-маркеров, заключающийся в ам­ плификации ДНК с помощью двух праймеров с дополнительным нуклеотидом и уве­ личении температуры отжига. В результате повышалась специфичность реакции и стабильность полученных ПЦР-продуктов. Метод может служить полезным инструментом для геномного анализа сельскохозяйственных культур. Ключевые слова: селекция растений, полиморфизм, ДНК-технологии, молекуляр­ но-генетические маркеры, RAPD-анализ. Важнейшую роль в селекции новых сортов сельскохозяйственных культур выполняют фенотипические проявления генов — маркеры. Они отражают экспрессию либо самого гена, определяющего ценный при­ знак, либо его ближайших соседей по хромосомам и служат для обна­ ружения, оценки, отбора растений с хозяйственно ценными признаками, а также отслеживания их в селекционном процессе и в семеноводстве [!]• В настоящее время особое внимание уделяется разработке удоб­ ных молекулярно-генетических маркеров, позволяющих иметь тест- системы на уровне генетического материала клетки (полиморфизм ДНК). За короткий срок новые ДНК-технологии нашли широкое приме­ нение для решения многих задач практической генетики: для оценки ге­ нетического разнообразия растений, паспортизации и классификации сортов, в картировании хозяйственно-ценных признаков. Достижения последних 20-25 лет убедительно свидетельствуют, что эти мощные технологии могут ускорять и улучшать программы селекции растений [2; 3]. Методологический подход к проблеме выявления полиморфизма, основанный на амплификации (многократном умножении) фрагментов ДНК in vitro с помощью фермента полимеразы, получил название поли­ меразной цепной реакции — ПЦР. Развитие ПЦР-технологии привело к созданию большого числа техник и систем маркирования, применяе­ мых в популяционных или генетико-селекционных исследованиях. Маркеры, генерированные в процессе ПЦР-анализа, отличаются по сте­ пени надежности; стоимости; трудоемкости, природе полиморфизма, обнаруженного с их использованием [4]. 180