434 / 678
фицирования). Для осветления собранную
культуральную жидкость пропускали через
префильтр из стекловолокна в статическом
режиме под давлением 0,2-0,5 кг/см2. Затем
проводили микрофильтрацию через ядерные
лавсановые мембраны со средним размером
пор 0,06-0,08 мкм. Культуральная жидкость
на данном этапе концентрировалась по
объему в 10 раз. Фильтрат концентрировали
на ацетатцеллюлозной мембране Владипор
УАМ-ЮОМ с номинальным пределом м. м.
15-30 кД. После достижения 30-кратного
концентрирования по объему и частичного
удаления низкомолекулярных примесей с
мол.м. 10-30 кД, получали концентрат, очи
щенный в 350 раз (по белку), с м.м. целевого
продукта 40-90 кД. Полученный после ульт
рафильтрации препарат подвергали до
очистке на колонке модели К 16/40, запол
ненной ультрагелем АсА-44 (Фирмы «ЫСВ»,
Швеция). Активность и концентрацию очи
щенного gA определяли в иммунофермент-
ном анализе (ИФА).
Специфические материнские и поствак
цинальные антитела к вакцинным препара
там определяли в ИФА [2, 5].
Результаты исследований и обсуждение.
Опыты проводили в хозяйстве яичного
направления, которое характеризовалось
высоким процентом выбраковки и падежа от
БМ среди вакцинированного поголовья. К
моменту постановки опыта поражаемость
птицы составляла 30-40 %.
Ранее нами было установлено [1, 2, 4],
что с ухудшением качества вакцинного пре
парата на основе ВГИ (уменьшение иммуно
генных свойств в процессе непрерывного
пассирования на ККПЭ) концентрация gA в
нем возрастает. В данном птицехозяйстве
применяли моновалентную вакцину на осно
ве ВГИ с разным содержанием gA.
Всерии экспериментов изучали развитие
гуморального иммунитета у кур по динами
ке специфических антител к ВГИ, ВБМ
(штамм Jm), а также gA. Для опыта было
сформировано три группы цыплят по 800 го
лов. В 1 и 2 группах цыплят прививали про
изводственной вакциной на основе ВГИ, по
добранной в предварительных опытах по ко
личественному содержанию gA в препара
тах, по количеству фокусообразующих еди
ниц на культуре клеток и по количеству пол
ноценных вирионов (ПВ), определенных в
ИФА: для первой группы эти показатели со
ставляли 400 тыс. ФОЕ/смЗ, 200 тыс. ПВ/смЗ
и 600 нг/смЗ gA; для второй группы - 400
тыс. ФОЕ/смЗ, 150 тыс. ПВ/смЗ и 30 нг/смЗ
gA. В третьей группе проводилась плановая
вакцинация цыплят коммерческой вакци
ной. Клиническое наблюдение за поголо
вьем и патологоанатомическое вскрытие
птиц позволили выявить в возрасте 70 дней
характерные признаки для БМ в 21,4 % (пер
вая группа) и 4,1 % (вторая группах). В груп
пе 3 характерные для БМ изменения были
обнаружены у 32 % павшей и выбракован
ной птицы.
На протяжении опыта осуществляли
клиническое наблюдение, патологоанатоми
ческое вскрытие павшей птицы, учет павшей
и выбракованной птицы, отбор крови в су
точном возрасте и на 10, 20, 30, 40, 56, 70, 90
и 120 дни после вакцинации. Всего исследо
вано 152 сыворотки в разведении 1:50, 1:100
и 1:200.
В результате исследования сывороток в
ИФА с антигенами ВГИ и ВБМ у 100 % цы
плят в суточном возрасте в ИФА обнаруже
но высокое содержание материнских антител
к ВГИ и ВБМ. Взависимости от состава при
мененного препарата наблюдали либо рез
кое, либо плавное снижение их уровней (см.
рисунок). Отличительной особенностью сы
вороток, полученных от цыплят одной из
групп, где вакцинация проводилась препара
том с избыточным содержанием gA, является
отсутствие материнских антител, реагирую
щих с ВБМ уже на 10день после вакцинации.
Возможно, что такое резкое падение уровня
антител произошло за счет частичной их
нейтрализацией избыточным количеством
gA, введенным с вакцинным препаратом. Ви
димо, пассивный иммунитет к ВБМ вданном
опыте имел определенное положительное
значение в начальном периоде вакцинально
го процесса. Отсутствие поствакцинальных
антител на 40, 50, 60 дни свидетельствует о
том, что трудно добиться желаемого имму
низирующего эффекта при вакцинации пре
паратами, содержащими gA в высокой
концентрации.
Первый подъем антител в этой группе
зарегистрирован на 70 день.
У цыплят, вакцинированным препара
том с нормальным количеством gA, содер
жание материнских антител против ВГИ и
ВБМ плавно снижалось к 30 дню после вак
цинации.
У цыплят 2 группы (отход от БМ 4,1 %)
содержание антител против ВГИ и ВБМ
плавно снижалось к 30 дню после вакцина
ции. Значительный подъем уровней поствак-
429
Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека