Казеиновая белковая кислота : (методы получения и физико-химическая характеристика)

ЗАТРУДНЕНИЯ, СВЯЗАННЫЕ С ПОЛУЧЕНИЕМ ПРЕПАРАТА ЧИСТЕЙШЕЙ КАЗЕИНОВОЙ ПРОТОКИСЛОТЫ Препарат чистейшей казеиновой протокислоты занимает место между: 1) нативным белком, где казеиновая прото- кислота будет анионом, а вся она или часть её соединена с некоторым антикомплексом, т. е. щелочным телом, начи­ ная от металлов и кончая сложными щелочными органи­ ческими соединениями, и 2) рядом возможных соединений, где белок может быть катионом. Задачей экспериментатора и является подыскать условия выделения казеиновой про­ токислоты в чистейшем виде, свободной от антикомплек­ сов, условия, при которых была бы исключена необходи­ мость перезарядки и перевода белка в катион. На пути встречаются такие затруднения. Белковый ком­ плекс, эфирир,ованный органическими антикомплексами и комбинацией с фосфатами Са, трудно омыляется. Это вызывает необходимость повышать концентрации щёлочи для перерастворения и повторять переосаждения. Соляная кислота может растворять нативный белок и, перезаряжая комплекс, переводить его в раствор; уксусная не обладает такими свойствами. Она легко даёт со щёлочью буферные свойства, что совершенно может извратить ряд констант, так как эти соли легко абсорбируются белком. Поэтому для выделения протокислоты принята комбинация из двух кислот: НС1 и СНзСООН. В случае неудач требуется ряд предосторожностей и поправок. Основное внимание при выделении казеиновой белковой протокислоты следует обращать на концентрацию белка при переосаждении протеиновых растворов. Она не должна быть выше 1%, иначе веймариды будут грубы и препарат белка не будет растворяться в естественном растворителе на холоду. Наименьшей концентрацией белка при лере- осаждениях может считаться 0,2%; в более разбавленном растворе казеиновая протокислота не будет или будет очень трудно осаждаться из раствора и проявлять склон­ ность к перезарядке. Протирание препаратов должно производиться сквозь сито вместе с жидкостью: в этом случае сгустки казеино­ вой протокислоты размельчаются лучше, чем при простом растирании. Требуется постепенная смена спирта от 50° до абсолют­ ного, чтобы не допустить необратимого загелевания белка. Вытеснение спиртом воды, эфиром спирта и эфира суше­ 46 Электронная Научная Сельскохозяйственная Би лиотека