Биохимия белковых веществ

Следующей нашей задачей было получение альбумина и лакто- протеина из молока и.испытание их свойств. При осаждении казеина в молочной сыворотке остаются глобу- .лин и альбумин. Принято, что содержание глобулина в естествен­ ном молоке не превышает нескольких миллиграммов на литр, а так тсак мне приходилось работать при выделении белков с количест- лами, не превышавшими 1—2 л (ввиду отсутствия осаждающих реактивов), то глобулиновой фракцией я решил пренебречь. Обычный способ получения альбумина заключается в высали­ вании его (NH 4 ) 2 S 04 и последующем диализовании осадка. Дли­ тельность процесса осложняется обстоятельствами, вредно влияю­ щими на результат: при диализовании часть альбумина переходит в промывной сосуд, при конце процесса может наступить бакте­ риальное разложение альбумина; даже весьма длительный процесс .диализа не в состоянии отмыть всех солей от альбумина. Поэтому я прибегнул к коагуляции альбумина при помощи этилового спирта. Один-два литра молочной сыворотки от уксусной кислоты сме­ шиваются с равным объемом 97°-ного спирта. При энергичном встряхивании мутная жидкость дает в осадке мелкие хлопья. Пос- .ле двухдневного стояния осадок отфильтровывается. В фильтрате белки отсутствуют. Осадок на фильтре промывается спиртом, до пол­ ного обезвоживания, и эфиром “ до удаления следов жира и су­ шится при 40® в термостате. Этот препарат я называю «уккисспэф». «Уккисспэф» дает при сожжении золу, главным образом, фос­ форно-кальциевые соли, в соде нерастворим, отчасти растворяется в естественном растворителе, в 5% -ном растворе С 6 Н 4 ОН COONa, тг/ 1 — NaOH. 10%-ном СНзСООН, N — НС1. В растворе идет биу- ретовая реакция. Из растворов — естественного растворителя в са­ лициловом натре и в NaOH осаждается при усреднении уксусной кислотой, из растворов — в СН 3 СООН и СНС1 осаждается NaOH при усреднении. Остаток от растворения в NaOH растворяется в СНзСООН, остаток от растворения в СН 3 СООН растворяется в NaOH. Объясняется это явление следующим. Спирт коагулирует из .сыворотки белок, а также соли кальция. Уккисспэф и есть смесь этих веществ. Белок из него нацело растворяется в щелочи и от­ части в кислоте, соли кальция — нацело в кислоте и незначительно в щелочи. Для получения чистого белка из уккисспэф необходимо .или отмыть от него соли кальция хотя бы уксусной кислотой, или извлечь щелочью белок с последующим осаждением его кислотой. Первый способ не дал хороших результатов. От 5%-ной СНзСООН наступало набухание и отчасти растворение белка, а менее слабая не отмывала (не растворяла) соли кальция ввиду значительной их концентрации в осадке. Второй способ дал результаты более благоприятные. Уккисспэф настаивался слабым (1—2%) НагСОз. Отфильтрованный раствор подкислялся' уксусной кислотой и осаждался спиртом. Полученный после обычных промывок препарат растворялся легко в естествен- ZV Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека