Биохимия белковых веществ
2%-ным раствором СНзСООН в течение 2— 3 суток в тройном объ еме по отношению к объему семенной муки. Кислота сливалась^ а мука промывалась до исчезновения кислой реакции. После этого мука заливалась водой до тройного объема и доводилась крепким раствором NaOH (10%) до ясно щелочной реакции, затем прибав лялась щелочь в таком количестве, которое отвечало бы эквива ленту белка, там находящегося (эквивалентный вес— 1220 ). Для большего выхода белка обработку NaOH повторяют. Об работка щелочью длится 2—3 суток, при помешивании. Вытяжка белка со щелочью, отделенная от муки, нагревается на водяной бане до в течение 2—3 часов. Из вытяжки, охлажденной до 20 °, белок осаждается при помощи 10%-ного раствора НС1 при pH = 4,7. Отфильтрованный промытый белок растворяется в щелочи с соблюдением соотношения концентрации — белка до 0,5%, NaOH до 0,25%, нагревается до 90° и при охлаждении до 20° снова оса ждается НС1 при pH == 4,7. Эта операция повторяется до 7 раз- уже без нагревания. Окончательно осажденный белок отфильтро вывается, промывается до отсутствия кислой реакции и протирает ся сквозь сито с водой. Помещается на фильтр и промывается сла бым 60%-ным спиртом, переносится в 96%-ный спирт на сутки, при помешивании. Снова отфильтровывается, протирается со спир том сквозь сито, помещается в экстракционную гильзу в аппарате Сокслета и обрабатывается абсолютированным спиртом и эфиром до возможно полного удаления воды, жира и красящих веществ- Полученный чистый порошок белка растирается в ступке, ос вобождается от эфира, просеивается через сито № 9 и помещается в эксикатор над H 2 SO 4 на 14— 15 дней. Выдержанный в эксикато ре препарат подвергается исследованию. По ^той методике были получены белки из указанных ранее се мян растений. Ввиду того, что все они давали реакции на белки и все титровались щелочью, они были признаны как белковые про токислоты под названиями: нутовая, овсяная, хлопковая, фисташко вая, лабурновая (золотой дождь), дроковая, альбициевая, миндаль ная, софоровая, церцисовая (иудино дерево). При изучении их свойств было решено, в первую очередь, уста новить точно изоэлектрическую точку осаждения, потерю в весе при 105° и процент золы. Анализ данных табл. 1 показывает, что все полученные веще ства являются белками; имеют изоточку от 4,6 до 4,8, близкую к казеиновой протокислоте; растворимы в естественном растворителе, но при разной температуре; потеря в весе при нагревании до 105° у них колеблется от 5,04 до 7,46% при условии, что у казеиновой протокислоты она равна 2,5%, но верхняя граница отдельных пре паратов у нея доходит до 6 %; наконец, процент золы колеблется от 0,54 до 3,57, у казеиновой он равен 0,45: Далее, все эти белковые протокислоты были изучены на содер жание N и трех наиболее важных аминокислот — триптофана, ти розина и аргинина. 324 Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека
RkJQdWJsaXNoZXIy