Биохимия белковых веществ

характеристик белкового вещества, и по существу число титрования определяет эквивалентный вес вещества, т. е. главную основную химическую константу, без которой невозможно изучать вещество, особенно его однородность. Число титрования определяется в на­ веске препарата протокислоты с прибавлением воды прямым тит­ рованием л/10 NaOH по фенолфталеину до начальной розовой ок­ раски. Определение числа титрования белковой кислоты может быть проведено после предварительного растворения ее в естественном растворителе (5 г К 2 НРО 4 • aq + 1 г КС1 + 1 г NaCl в 1 л воды) и титрования по фенолфталеину до окрашивания. Значения величин титрования по обоим методам близко сходятся. Из числа титрова­ ния выводится эквивалентный вес по формуле Э. в. = 40 10000 ч. Т. 0,004 ч. Т Изоэлектрическая точка по осаждению является чрезвычайно характерной константой для белковых веществ, ибо в зависимости от происхождения и места белка в существующей классификации протеинов она достаточно сильно меняется. Изоэлектрическая точка есть то pH, при котором совершается максимальное и полное вы­ падение белка. Теоретически для этого пункта имеются два объяс­ нения: 1 ) при этом происходит полная нейтрализация белка, при которой он становится нерастворимым; 2 ) при этом происходит вы­ равнивание зарядов среды и фазы, которое и влечет за собой коа­ гуляцию. Авторы придерживаются второго объяснения. Поскольку эта точка характерна для белка, постольку к ней прибегают, оформ­ ляя ее методически по Михаэлису, а именно — в пробирках приго­ товляются растворы белка, pH которых от 3 до 10 , и наблюдается максимальность коагуляционного процесса. Максимум коагуляции совпадает с изоэлектрической точкой, выраженной в значении pH. Титр буферности есть показатель, указывающий на запас в бел­ ке групп СООН или NH 2 или обеих вместе, дающий возможность говорить о силе сопротивляемости белка смещению концентрации водородных ионов от кислоты и от щелочи. Титр буферности для белков может быть определен от изоэлектрической точки до рН =7, т. е. нейтрального значения концентрации водородных ионов, но мо­ гут быть заданы и другие границы буферности, не связанные с изо­ электрической точкой. В нашем исследовании титр буферности был взят от pH = 7 до pH = 8 ,2 , т. е. между двумя индикаторами: бромтимолблау — зеленое и фенолфталеин — красное, для того, чтобы наблюдать за наличием буферности щелочных групп. Все препараты исследованы колориметрически и электрометрически про­ верены в смысле точности определения. Формольный титр есть указание на уничтожение формальдеги­ дом свободных групп NH 2 , мешающих титрованию карбоксильных групп белка. Формольный титр может говорить только о тех груп­ пах NH 2 , которые высвобождают СООН, а не о всех аминных груп­ пах, но это и есть главное указание, дополняющее число титрова­ ния, ко не мешающее ему, ибо п/10 NaOH одинаково титрует по^ 276 Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека