Биохимия белковых веществ

ной, обычно pH = 8 , 3 , доводился п /2 НС 1 до реакции по метилроту р Н = 5,2 (желтое окрашивание переходит в оранжевое), после это­ го раствор осаждался при pH =^ 4,7 10% -ной СНзСООН. Такой порядок применялся, чтобы не вызвать большой буфер- ности раствора при осаждении только СНзСООН, так как при усреднении получающаяся NaCl не дает буферности или сильной поддерживательной роли для белка. Полученные сгусаки фибриновой кислоты тщательно отмывались от солей, кислоты и т. д., вначале прибавлением воды и декантиро­ ванием, потом фильтрованием и промыванием на фильтре. Совер­ шенно промытые сгустки снова подвергались растворению при тех же условиях расчета щелочи для связывания и разведения раство­ ра до предельной концентрации в . Уже светлый, ибо при пер­ вых растворениях раствор обладал легкой желтой окраской, он фильтровался снова через вату и осаждался при постепенном прн- ливании кислот, сначала НС 1 до pH == 5 , 2 , далее СНзСООН до pH = 4 , 7 . Снова образовавшийся сгусток — белый и хорошо оформ­ ленный. Многократно промывался на фильтре дестиллированной водой и несколько раз спиртом. Полученная таким способом сырая фибриновая кислота, уже более очищенная, подвергаласьрастворению втретий раз л/10 NaOH, с расчетом эквивалентов белка и щелочи, светлый раств<^|) фибрн- ната фильтровался, кроме ватного, через бумажный фильтр без дав­ ления. Почти прозрачный золь фибрината доводился до концентра- £ ции ; при помощи /г /2 НС1 переводился в кислое состояние до pH = 5,2 И осаждался 10%-ной СНзСООН при pH = 4,7 в изоэлек- трической точке белковых кислот. Полученные белые сгустки фибриновой кислоты тщательно и многократно промывались дестиллированной водой, а под конец би- дестиллятом, и из них отжималась лишняя вода. Мелко растертые, они обрабатывались на фильтре несколько раз спиртом для пред­ варительного отнятия воды и протирались вместе со спиртом сквозь тонкое сито (шелковое). Протертая масса белковой кислоты помещалась в экстракцион­ ную гильзу и закладывалась в сокслетовский аппарат. В нем прово­ дилось экстрагирование спиртом в течение нескольких ( 2 —3) дней, при условии смены спирта: сначала 96°-ным, а потом абсолютным (при помощи прокаленной CUSO 4 ). Абсолютный спирт давал полное отнятие воды, переведение из системы Т -f- Ж вода в систему Т + Ж спирт. После обработки абсолютным спиртом и пробы вынутого по­ рошка на высушивание, экстрагирование продолжалось безводным серным эфиром в течение двух-трех суток, при условии смены эфи­ ра. После обработки эфиром порошок фибриновой кислоты выни­ мался из эксикатора и быстро переносился в фарфоровую ступку. При энергичном растирании достигалось удаление эфира с одно- 234 Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека