Биохимия белковых веществ

типа щелочного белка, то возможно получить при известной мето­ дике их раздельно и характеризовать как количественным выхо­ дом, так и качественными особенностями. Для подтверждения такого положения были взяты семена го­ роха. Эфирообразное соединение может разлагаться двумя способа­ ми: 1 ) омылением, с тем чтобы сильной щелочью отнять слабую ‘белковую кислоту и перевести в протеинат, оставив антикомплекс свободным, 2 ) воздействием сильной кислоты, которая может от­ нять от слабой кислоты слабые основания и оставить эту слабую кислоту в чистом виде. Первый способ, проведенный многократно с целым рядом проб семян гороха, не дал вполне удовлетворительных результатов, что объясняется фактом, что кроме омыления происходит растворение в щелочи самого нативного неизмененного белка, и получается пе­ страя картина присутствия в фильтрате смеси: комплекса, анти­ комплекса и нативного белка. Провести разделение этих веществ из смеси очень трудно. Второй способ оказался вполне удовлетворительным. Весь ан- 7 икомплекс перешел в кислую вытяжку. В ней не оказалось комп- -лекса и нативного белка в силу, очевидно, весьма малой их раст- уБоримости в кислотах. При pH = 4,7 никаких выпадений не наблю­ далось, как и вообще во всем пространстве шкалы pH от 7,0 до 2 , 0 . Отсюда выработалась следующая методика получения антиком­ плекса из белков гороха. Известная навеска семян гороха, около 200 г, заливалась п/10 H 2 SO 4 до 500 настаивалась в течение трех суток при помешивании через 2 —6 часов. Полученный раствор антпкомплекса осторожно декантировался и отфильтровывался через бумажный фильтр. Прозрачный фильтрат проверялся на отсутствие свободной белковой кислоты подщелочением его до pH = 4,7. В него вливался 5%-ный раствор фосфорно-вольфрамовой кислоты, впредь до отказа на осадок. Раствор антикомплекса обладал все­ ми присущими ему свойствами, т. е. малой вязкостью и малым по­ верхностным натяжением. После приливанпя кислоты поверхностное натяжение доходило до 1,0. Полученный осадок после промывания п/50 H2SO4 на фильт­ рате подвергался воздействию Ва(ОН)г в порошке. При растира- шш в полученной щелочной пасте вещество окрашивалось в интен­ сивно голубой. цвет, после пропадающий. Щелочной раствор анти­ комплекса в Ва(ОН )2 отфильтровывался от осадка и подвергался воздействию п H 2 SO 4 впредь до окончания реакции на фенолфта­ леин, т. е. до pH = 8,0. После этого концентрация кислоты уменьшалась до п/10 H 2 SO 4 и по каплям раствор доводится до pH = 4 , 9 —4,7, т. е. до появления первых следов свободной H2SO4. Осадок BaS 04 отфильтровывался, тогда в фильтрате оставался чистый раствор антикомплекса или соль его с H2SO4. Раствор при этом не давал реакции нп на Ва, ни на H2SO4. 165 Электр нная Научная СельскоХозяйственная Библиотека

RkJQdWJsaXNoZXIy