Биохимия белковых веществ

Ввиду того, что белковая кислота оказывается в осадке, мы имеем в жидкости, кислой от избытка НС1, раствор соли антиком­ плекса в растворе NaCl. Этот раствор отфильтровывался от осадка, в результате чего получался почти прозрачный раствор коллоид­ ного типа, дающий белковые реакции, но не содержащий белко­ вой кислоты (проверено). Следующей операцией было выделение антикомплекса в чистом виде. В основу этого выделения было положено общее свойство предполагаемого антикомплекса, осаждаться фосфорно-вольфрамо­ вой кислотой в кислом растворе (при прибавлении H2SO4). Операция осаждения проводилась так: раствор, отфильтрован­ ный от осадка белковой кислоты, подкислялся H 2 SO 4 до pH = 3,0. Прибавлялся 5%-ный раствор фосфорно-вольфрамовой кислоты вплоть до прекращения осадка, что проверялось в отдельных про­ бах. Осадок тяжелый, легко садился на дно. После стояния в те­ чение четырех-пяти часов он отфильтровывался на обыкновенном фильтре, промывался слабым раствором H 2 SO 4 (я/ 20 )' и поступал Е следующую стадию обработки. Осадок фосфорно-вольфрамового антикомплекса переносился в ступку, прибавлялся в порошке Ва(ОН )2 в избытке до щелочной реакции. При добавлении избытка Ва(ОН )2 появлялся яркосиний цвет, напоминающий реакцию на витамины, проходивший со вре­ менем. После тщательного растирания к осадку приливалось коли­ чество воды в таком размере, чтобы жидкая первоначальная па­ ста могла быть названа раствором с осадком. Этот раствор фильт­ ровался через обычный фильтр и в фильтрате получился антикомп­ лекс в чистом виде, в растворе Ва(О Н ) 2 . Этот фильтрат под­ вергался осаждению H2SO4 вплоть до полного удаления Ва. До­ стигалось это наблюдением за pH раствора. Прибавление H2SO4 вызывало осадок BaS 04 и нейтрализацию жидкости. При pH = 7 появлялись соли антикомплекса с H2SO4. Ввиду буферности этой системы соли сильной кислоты и слабого основания давали pH в кислой среде от 7 до 4,7, смотря по степени разложения. Мо­ мент pH = 4,7 знаменовал окончание реакции солеобразоваиия и появление чистой H2SO4, ибо она, как сильно диссоциированная кислота, скачком переходит границы буферности. ’ Доведенной до pH = 4,7 фильтрат антикомплекса не содержит минеральных солей, и, как правило, в нем отсутствует свободная H 2 SO 4 , ибо чисто оттитрованная серной кислотой щелочная барие­ вая вытяжка не дает реакции на SO "4 после фильтрования. Отсюда я делал заключение о наличии в фильтрате или чистого антикомплекса фибрина или его сернокислой соли, не разлагаемой в двойном обмене с солями. Совершенно прозрачный фильтрат подвергался выпариванию в фарфоровой чашке на водяной бане при температуре между 80— 90^^ до густоты. После переносился в сушильный шкаф п при темпе­ ратуре 60^ и высушивался досуха. После этой операции помещался в эксикатор над H 2 SO 4 до полного удаления воды. В этом виде он представлял собою чуть желтый субстрат, легко 151 Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека