Practicum по физиологии растений, обработанный применительно к программе практического курса для студентов-ботаников Императорского СПБ. университета прив.-доц. А. А. Рихтером

Окраска по Граму служить характернымъ отлич!емъ для многихъ бациллъ: некоторые микробы „берутъ Грамъ", т. е. остаются окра­ шенными въ фюлетовый цв'Ьтъ, друПе „не берутъ Грама“ т. е. рас­ крашиваются спиртомъ и окрашиваются потомъ въ красный цв*Ьтъ везувиномъ, эозиномъ и пр., наряду съ клетками ткани и т. п. Генц1анъ-вюлетъ по Граму или анилинъ-генцтанъ-вюлетъ приготовляется взбалтывая дестиллированную воду съ ани- линомъ, отфильтровывая анилиновую воду черезъ смоченный фильтръ и прибавляя къ ней спиртовой растворъ краски до появлешя на поверхности иризующей пленки. 1одъ по Граму: 1оду 1,0, KI— 2,0, воды 5,0; после раст* ворешя прибавить 295 cm3 воды. Задача 2 . Получить чистую культуру стпного бацилла (Bacillus siibtilis ). (Злективнымъ методомъ). . Н а с т о я т ь свежее сено (250 д) въ воде (2000,0) при на- гр^ваши (кипятить 301). Въ растворъ переходятъ питательный вещества и распределя­ ются въ немъ бывиля на сен е клетки и споры микроорганизмовъ. С л и т ь растворъ въ колбы по Г00— 200 сих3., запереть ватными пробками (фильтры противъ заражешя извне!) и прогреть при 100° въ Коховскомъ стерилизаторе 301. Нагреван 1 емъ въ текучемъ паре стерилизуется (обезпложивается) растворъ, пробки и стенки сосудовъ. Выдерживаютъ нагреваШе (до 3 часовъ при 100°!) лишь споры сенного бацилла. П о с т а в и т ь въ термостатъ при 3 0 —35°. Изследовать черезъ 24, 48, 72 часа. Споры прорастаютъ черезъ 3— 4 часа въ подвижныя палочки, переполняюцця жидкость; использовавъ питательный вещества и кислородъ жидкости, бациллы собираются на поверхность, образуя бактер4альную пленку— з о о г л е ю. Затемъ начинается образоваше споръ, по одной въ каждой палочке. Н а б л ю д а т ь : 1. Подвижную стад1ю въ капле раствора (взять прокаленной платиновой проволокой). 2. Зооглею, (окрасить синькой или по Цилю). 3. Споры (сделать дифференц1альную окраску). Для дифференШальной окраски споръ фиксированный препараты обрабатывается 1°/о хромовой кислотой въ теченХе 5 минуть, про­ мывается, нагревается въ капле карболоваго фуксина Циля 5 —10 ми­ нуть до выделешя паровъ (не давать кипеть!). Смыть водой, обрабо­ тать крепкимъ спиртомъ, смыть, окрасить синькой Леффлера 2 минуты. Разсматривать съ иммерз!ей. Сравнить: Абель, Бактерхолопя. Детмеръ, § 45. Для задачъ необходимы: Колбы,7котелъ эмальированный Стекла покровныя и предметныя. Краски. Платиновая проволока. — 20 — Электронная Научная Сельскохозяйственная Библиотека