NED379019NED

16 По результатам ПЦР-анализа практически не обнаружены разли- чия в полученных RAPD-спектрах между образцами овсяницы, относя- щимися к разным видам. Значительное сходство отмечено даже при сравнении продуктов амплификации райграса и овсяницы (рис. 3). Это указывает на филогенетическую близость анализируемого материала и согласуется с литературными данными проведенных ранее исследова- ний [12]. Рис. 3. Электрофореграмма продуктов ПЦР образцов и межвидовых гибридов райграса и овсяницы с RAPD-праймерами М — маркер молекулярной массы (100 bp DNA Ladder); 1 –7 — образцы злако- вых, соответственно: 1 — райграс многоцветковый; 2 — овсяница тростниковая; 3 — овсяница луговая; 4 — райграс пастбищный; 5 — фестулолиум № 6 (рай- грас многоцветковый × овсяница тростниковая); 6 –фестулолиум № 49 (райграс многоцветковый × овсяница луговая); 7 — фестулолиум В-90 (райграс много- цветковый × райграс пастбищный). Сравнительный анализ RAPD-спектров показал, что наилучшие результаты по выявлению полиморфизма у злаковых трав получены при использовании праймера OPQ-09. В продуктах ПЦР с этим праймером обнаружены различия между образцами райграса разных видов. Так, фрагмент амплификации размером 500 bp, выявленный в образце № 1 ( Lolium multiflorum Lam.), отсутствовал в образце № 4 ( Lolium perenne L.) Тогда как ампликоны в 600 и 1000 bp, полученные с этим праймером в ПЦР с образцом № 4, не выявлены при анализе образца № 1. Как было указано выше, эти образцы райграса имеют различное происхождение, относятся к разным видам и различаются между собой по биологическим свойствам, в частности, по долголетию хозяйствен- ного использования. Результаты проведенного ПЦР-анализа позволили установить различия между ними и на генетическом уровне, что может быть использовано в качестве дополнительного инструмента к традици- онным методам при видовой и сортовой идентификации райграса. Сравнение RAPD-спектров межвидовых гибридов фестулолиума № 6 и 49 и их родителей, анализируемых под номерами, соответственно 1 и 2, и 1 и 3, подтвердило гибридную природу полученных форм. Так, при амплификации с праймером OPQ-09 обнаружен фрагмент в 500 пар оснований, характерный для одного из родителей (райграс № 1) и со- 1 2 3 4 5 6 7 М 1 2 3 4 5 6 7 М 1 2 3 4 5 6 7 М Праймеры: OPQ-09; OPQ-15; OPB-07