NED379019NED

14 1. Характеристика RAPD-праймеров, использованных для ПЦР-анализа образцов козлятника восточного, райграса и овсяницы Праймер Нуклеотидная последовательность Общее число фрагментов амплификации Размер ампликонов (пар оснований) козлятник райграс/ /овсяница козлятник райграс/ /овсяница OPQ-9 5 GGCTAACCGA 3 — 11 — 300–1000 OPQ-15 GGGTAACGTG — 14 — 300–1000 OPN-15 CAGGCGACTGT 18 — 500–1600 — OPC-02 GTGAGGCGTC 14 — 300–1100 — OPB-03 CATCCCCCTG — — — — OPB-07 GGTGACGCAG 17 16 300–1500 500–1000 OPB-11 GTAGACCCGT 13 — 300–900 — OPB-12 CCTTGACGCA — — — — OPB-15 GGAGGGTGTT 14 — 300–1200 — OPB-17 AGGGAACAAG 16 — 200–1600 — Рис. 1. RAPD-профили геномной ДНК сортообразцов козлятника восточного М — маркер молекулярной массы (100 bp DNA Ladder); 1, 2, 3 — сортообразцы СЭГ-4, СЭГ-2 и СЭГ-1 соответственно. Полученные RAPD-профили амплифицированных фрагментов ДНК различались в зависимости от праймера как по числу зон амплифи- кации (от 3 до 6), так и по степени полиморфизма. В среднем, с каждым праймером было получено 5–6 полос спектра на один образец ДНК. При этом обнаружены специфичные ампликоны. Так, фрагмент амплифика- ции размером 900 пар оснований, полученный с праймером OPB-07 в бе- лоцветковом сортообразце СЭГ-1, отсутствовал в образцах с сиреневыми СЭГ-2 и синими цветками СЭГ-4, а фрагмент размером 1100 нуклеотид- ных пар, генерированный праймером OPB-11 в образце СЭГ-2, не на- блюдался в двух других образцах. С праймером OPB-17 в образце СЭГ-4 идентифицированы фрагменты 700 и 1100 пар оснований, которые от- сутствовали у СЭГ-2 и СЭГ-1. RAPD-профили тестируемых образцов с ин- формативными (полиморфными) праймерами представлены на рисунке 2. M 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 Праймеры: OPN-15; OPB-07; OPB-15; OPB-11; OPB-17; OPC-02