NED379017NED

86 инокуляции агрессивным изолятом культуры патогена гриб за 4–5 дней распространялся по всей поверхности культуры (каллус, эмбриогенная ткань) и быстро приводил к ее гибели независимо от происхождения клеточной культуры. Поэтому культура гриба для отбора устойчивых генотипов нами не использовалась. Для отбора устойчивых генотипов клевера лугового использовали культуральный фильтрат (КФ) гриба Sclerotinia trifoliorum [2]. Избирательность действия КФ на клеточные культуры клевера лу- гового зависела от его концентрации. При разведении 1 : 400 из 236 кле- точных культур, полученных из пяти сортов, не было выявлено ни од- ной, выдерживающей эту концентрацию, независимо от ее происхожде- ния. При снижении концентрации до 1 :500 жизнеспособность клеточ- ных популяций значительно варьировала (табл. 1). 1. Влияние культурального фильтрата Sclerotinia trifoliorum Еriks. на жизнеспособность и эмбриоидогенез клеточных культур клевера лугового Клеточная линия Исходный сорт Жизнеспособность клеток суспензионных культур, % Количество эмбриоген- ных структур, шт./мл суспензии селективная среда (КФ 1 : 500) контроль (среда В 5 ) селективная среда (КФ 1 : 500) контроль (среда В 5 ) ТР ВИК 7 79,5 ± 3,4 91,1 ± 2,9 18,9 ± 4,1 26,1 ± 3,0 Тетра ВИК 7 ВИК 7 81,1 ± 2,6 95,1 ± 3,0 19,8 ± 2,2 23,1 ± 1,9 Р-127 ВИК 7 16,9 ± 2,9 94,3 ± 2,3 0 123,5 ± 4,9 Т-340 Tapioi Poli 80,8 ± 2,6 92,1 ± 1,9 28,0 ± 3,0 35,9 ± 1,2 В-40 Vogones 43,8 ± 1,5 90,4 ± 2,1 3,6 ± 1,2 5,0 ± 0,4 Наименьшее снижение жизнеспособности отмечалось у клеточ- ных линий, полученных из тетраплоидных генотипов. Наименьшую ус- тойчивость к КФ показала диплоидная клеточная линия Р-127. В даль- нейших исследованиях ее использовали в качестве тест-объекта для подбора концентрации КФ, обладающего селективным действием. Та- ковой считали минимальную концентрацию КФ, при которой достига- лось снижение жизнеспособности клеток Р-127 до 15–20 %. Образование эмбриоидов в опытных вариантах, показавших ус- тойчивость к КФ клеточных линий, было достоверно ниже, чем в кон- трольных вариантах (при Р≤ 05). В процессе культивирования в среде с КФ отдельные эмбриоиды погибали, другие оставались зелеными и после пересадки на среду для регенерации образовывали морфогенную каллусную ткань, побеги и растения-регенеранты. Перед высадкой в грунт полученные регенеранты оценивали на устойчивость к патогену Sclerotinia trifoliorum Еriks. Для этого их пере-