1-248.indd

8 Болезни сельскохозяйственных животных SАТ-2, SАТ-3. В пределах каждого типа существует множество гене- тических и антигенных вариантов вируса [14, 15]. В России ящур не эндемичен, однако существует постоянная угроза заноса этой болезни из соседних азиатских стран, прежде все- го из Китая. Вспышки ящура, вызванные заносом инфекции извне, регистрировались в современной России в 1995, 2000, 2004-2006 и 2010-2015 гг. [2, 4-7, 9]. Быстрая и точная диагностика является важным элементом кон- троля этой болезни, обладающей высокой контагиозностью и тяжё- лыми социально-экономическими последствиями [8, 11, 15]. В лабораторной диагностике для обнаружения вируса ящура при- меняются различные методы: иммуноферментный анализ (ИФА), реакция связывания комплемента (РСК), выделение вируса в культу- ре клеток, различные модификации полимеразной цепной реакции c обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР). В 2008 г. в ФГБУ «ВНИИЗЖ» была разработана ОТ-ПЦР в ре- альном времени для обнаружения вируса ящура всех серотипов [8]. Целью данной работы было определение основных характеристик данного метода и использование их для его валидации. Материалы и методы Вирусы. В работе использовали вирусы ящура, везикулярной бо- лезни свиней, везикулярной экзантемы свиней и везикулярного сто- матита из коллекции штаммов микроорганизмов ФГБУ «ВНИИЗЖ». Выделение РНК. РНК из афтозного материала и вируссодержа- щих суспензий культуры клеток выделяли, как описано ранее [11]. ОТ-ПЦР в реальном времени проводили, как описано ранее [8]. Статистическая обработка данных. Прецизионность в услови- ях сходимости (повторяемости) и воспроизводимости определяли как степень согласованности результатов множественных анализов одного образца [1, 3]. Коэффициент вариации (С v ) рассчитывали по формуле [3] С v = σ / Х ср. × 100%, где Х – величина порогового цикла, определяемого в ПЦР-РВ; σ – среднее квадратичное отклонение, которое определяется по формуле σ = (Х макс – Х мин ) / К. Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека