1-248.indd

170 Биотехнология Таким образом, по результатам исследования для профилактики микробной контаминации культуры клеток BHK-21/2-17 оптимально использовать цефотаксим с концентрацией 60 мкг/мл, или 55 ЕД/мл, так как данное количество антибиотика на протяжении 7 последо- вательных пассажей защищает клетки от микробной контаминации, не приводит к цитоморфологическим изменениям и не снижает про- лиферативного потенциала клеток. Далее исследовали действие полимиксина В сульфата на биоло- гические свойства клеток линии BHK-21/2-17 с концентрациями: 50, 25, 13 мкг/мл и дозами 400, 235, 100 ЕД/мл, соответственно. На основе анализа сведений, приведенных в научных публикациях, тестировали влияние данного антибиотика с исходной концентра- цией 50 мкг/мл, которая, по данным Paul (1975), является рабочей дозой, используемой при выращивании клеток. Исследование про- водили в течение 3 пассажей, так как наблюдали выраженное токси- ческое действие антибиотика на клетки, проявляющееся в снижении ИПА и изменении их морфологии. Оценку влияния полимиксина В в более низких дозах на культуру клеток BHK-21/2-17 проводили на протяжении 7 последовательных пассажей. Результаты исследова- ния представлены в табл. 5. Из приведенных в табл. 5 данных видно, что снижение концен- трации полимиксина В приводит к увеличению пролифератив- ной активности клеток. Применяя данный антибиотик в дозах 50 и 25 мкг/мл, значения ИПА снижались относительно контроля в 15-20 и 1,8-2,2 раза, соответственно. При использовании полимикси- на В с концентрацией 13 мкг/мл была достигнута пролиферативная активность клеток, превышающая контрольные значения на 4-11%. Поэтому тестирование данного антибиотика в более низких дозах не проводили. На протяжении 7 последовательных пассажей через 24 и 48 ч по- сле посева в образцах клеточной суспензии, содержащих 13 мкг/мл полимиксина В, значения рН снижались с 7,0-7,2 до 6,2-6,5, что сви- детельствовало об активном процессе роста и развития клеток. Ис- пользование антибиотика в концентрациях 25 и 13 мкг/мл видимых морфологических изменений клеток линии BHK-21/2-17 не вызы- вало. Исследование на стерильность проб после каждого пассажа с разной концентрацией полимиксина В микроорганизмов не выявило. Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека