1-248.indd
168 Биотехнология в дозе 17 мкг/мл. Учитывая, что значения ИПА в данных условиях выше по сравнению с контролем, влияние данного антибиотика на клетки BHK-21/2-17 в более низких концентрациях не исследовали. В течение 7 последовательных пассажей через 24 и 48 ч после по- сева клеток в пробах, содержащих 17 мкг/мл ципрофлоксацина, зна- чения рН среды снижались с 7,0-7,2 до 6,3-6,5, что свидетельство- вало об активном процессе метаболизма клеток и подтверждало их высокую пролиферативную активность. Применяя данный антибио- тик в дозах 50, 25 и 17 мкг/мл, не наблюдали изменения морфоло- гии клеток BHK-21/2-17. В ростовой среде, содержащей 100 мкг/мл ципрофлоксацина, клетки выглядели уменьшенными в размере, с неровными краями. Исследуя пробы после каждого пассажа с раз- ным содержанием ципрофлоксацина на стерильность, бактерии, микоплазмы и грибы выявлены не были. Исходя из полученных данных, концентрация ципрофлоксацина, оптимальная для защиты суспензионной культуры клеток BHK-21/2- 17 от развития микоплазм, большинства грамотрицательных и неко- торых грамположительных микроорганизмов, составляет 17 мкг/мл. Следующий этап работы был посвящен оценке токсического дей- ствия на культуру клеток BHK-21/2-17 антибиотика цефотаксима (в виде натриевой соли) со следующими концентрациями: 100, 80, 60 мкг/мл и дозами: 95, 75, 55 ЕД/мл, соответственно. Сведения о применении цефотаксима для профилактики микробной контамина- ции клеток в научной литературе отсутствуют. Учитывая достаточно высокую токсичность данного антибиотика, при культивировании клеток BHK-21/2-17 тестировали цефотаксим с исходной концен- трацией 100 мкг/мл. Определив, что антибиотик в выбранной дозе оказывал токсическое действие на клетки, которое проявлялось в снижении пролиферативной активности и появлении цитоморфо- логических изменений, проводили 3 пассажа. Цефотаксим с мень- шими концентрациями тестировали в течение 7 последовательных пассажей. Результаты исследования отражены в табл. 4. Из табл. 4 следует, что при снижении дозы цефотаксима наблю- дали увеличение индекса пролиферации клеток. Так, значения ИПА при использовании данного антибиотика с концентрацией 80 мкг/мл были ниже контрольных на 27-34%, с дозой 60 мкг/мл – выше на 2-6%. Влияние цефотаксима на клетки линии BHK-21/2-17 в более Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека
RkJQdWJsaXNoZXIy