1-248.indd

165 Биотехнология технического регламента в процессе производства противоящурных вакцин после размораживания осуществляют до 7 пересевов кле- ток линии BHK-21/2-17. Определяли те концентрации антибиоти- ков, при которых ИПА клеток не ниже ИПА контрольного образца, а также отсутствуют цитоморфологические изменения и признаки микробной контаминации. На первом этапе работы проводили оценку токсического действия на культуру клеток BHK-21/2-17 ампициллина тригидрата со следу- ющими концентрациями: 1000, 1200, 1500, 1700 мкг/мл и дозами: 1600, 1920, 2400, 2720 ЕД/мл, соответственно. Поскольку ампицил- лин характеризуется низкими показателями токсичности, подобрали наибольшую дозу антибиотика, при которой отсутствует развитие посторонних инфекционных агентов, не наблюдается токсического влияния на морфологию клеток, а их пролиферативный потенциал не ниже контрольного. Доза ампициллина, равная 1600 ЕД/мл, была предложена в качестве исходной на основании анализа научных пу- бликаций [9, 13]. Выявив, что при данной концентрации ампициллин не оказывает выраженного токсического влияния на клетки линии BHK-21/2-17, провели 3 пассажа. Действие более высоких концен- траций антибиотика тестировали на протяжении 7 последователь- ных пассажей. Результаты исследования представлены в табл. 2. Как следует из табл. 2, при тестировании ампициллина тригидра- та с концентрациями 1000, 1200 и 1500 мкг/мл фиксировали значе- ния ИПА, превышающие контрольные на 34-36, 22-24 и 5-6%, со- ответственно. Применяя данный антибиотик с дозой 1700 мкг/мл, пролиферативный потенциал клеток линии BHK-21/2-17 через 48 ч снизился на 7,6-8,7% по сравнению с контролем. Через 24 и 48 ч после посева клеток в образцах со всеми тести- руемыми дозами ампициллина значения рН среды снижались с 7,0- 7,2 до 6,2-6,5, что свидетельствовало о быстрых темпах роста и развития клеток и соответствовало высоким показателям пролифе- рации клеток. На протяжении всех пассажей не наблюдали развития внешних цитоморфологических изменений. По результатам иссле- дования на стерильность, исследуемые образцы не были контами- нированы бактериями, грибами и микоплазмами. Высевы проб на питательные среды были без проростов в течение всех сроков наб- людения. Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека