1-248.indd

121 Болезни птиц Материалы и методы Вирус. Для заражения использовали изолят МПВ птиц подтипа А, выделенный из патологического материала от 6-месячных кур одной из птицефабрик Костромской области РФ в 2014 г., в виде культу- ральной суспензии 3 пассажа на первично трипсинизированной культуре клеток фибробластов эмбрионов кур (ФЭК). Эксперимент на цыплятах. 7-суточные цыплята бройлеры, не имеющие антител к МПВ птиц, были разделены на две группы по 20 голов в каждой. Первой группе вводили культуральную жикость, содержащую МПВ птиц подтипа А интраназально и закапыванием на конъюнктиву глаза в дозе 6,1 lg ТЦД 50 /0,4 мл на цыплёнка. Во второй (контрольной) группе цыплята оставались неинфицирован- ными. Обе группы цыплят содержались отдельно в изолирующих боксах. На 1, 3 ,7, 10, 14, 21, 28 сутки после инфицирования отбира- ли ротоглоточные смывы и проводили убой 3 цыплят из зараженной группы и 3 неинфицированных цыплят для патологоанатомического исследования и отбора проб биоматериала (кровь, Гардерова железа, решетчатая кость, инфраорбитальный синус, трахея, легкое, селе- зенка, бурса, тимус). До заражения и через 7, 14, 21 и 28 суток после инфицирования проводили отбор проб крови, слёзной жидкости и ротоглоточных смывов обеих групп цыплят для выявления специфи- ческих к МПВ птиц антител в ИФА. Иммуноферментный анализ (ИФА). Выявление антител к МПВ птиц проводили с использованием набора для определения антител к МПВ птиц иммуноферментным методом при тестировании сыво- роток в одном разведении ФГБУ «ВНИИЗЖ» согласно инструкции производителя. Результат реакции считали положительным при ве- личине титра антител 392 и выше (за титр антител принимали вели- чину, обратную разведению сыворотки). Определение титра антител к МПВ птиц в слёзной жидкости и трахеальных смывах цыплят проводили в непрямом варианте ИФА с использованием планшетов (Nunc, MaxiSorp, Дания), сенсибилизи- рованных антигеном МПВ птиц в 0,1 М карбонатно-бикарбонатном буфере (рН 9,5), по стандартному протоколу. Учёт реакции проводи- ли на спектрофотометре-ридере Sunrise Basic (Tecan, Австрия) при длине волны 405 нм с использованием компьютерной программы Электронная Научная СельскоХозяйстве ная Библиотека