1-248.indd

12 Болезни сельскохозяйственных животных Таким образом, проведенные эксперименты показали, что анали- тическая чувствительность ОТ-ПЦР-РВ составляет 10-100 ТЦД 50 /мл. Десятикратное различие в аналитической чувствительности на раз- ных штаммах, вероятно, объясняется выбранным 10-кратным шагом разведения образцов (при 2-кратном разведении различия могли бы быть меньше), а также возможной неточностью при определении ти- тра вируса в культуре клеток. Определение диагностической специфичности реакции . Для определения диагностической специфичности метода было иссле- довано 148 проб биоматериала от неинфицированных животных (рогатый скот и свиньи) из благополучных по ящуру регионов РФ (Московская, Тульская, Белгородская, Ленинградская, Новгородская области). Все пробы показали в ОТ-ПЦР-РВ отрицательный резуль- тат. Таким образом, диагностическая специфичность реакции на дан- ной панели проб составляла 100%. Определение диагностической чувствительности реакции. Для оценки диагностической чувствительности ОТ-ПЦР-РВ использова- ли пораженный эпителий (афты) от 19 голов КРС, эксперименталь- но инфицированных вирусом ящура типа О (14 животных), А (2) и Азия-1 (3). РНК вируса ящура была обнаружена во всех 19 про- бах. При этом для 11 проб пороговый цикл реакции (C t ) находился в пределах от 15 до 20, для 6 – в пределах 20-25 и для 2 – в пределах 10-15. Таким образом, диагностическая чувствительность реакции на данной панели проб составляла 100%. ОТ-ПЦР-РВ выявляла РНК вируса ящура в афтозном материале: значения порогового цикла не превышали 25. Вирус ящура отличается чрезвычайно высоким уровнем генети- ческого разнообразия. Способность ОТ-ПЦР-РВ обнаруживать раз- личные серотипы, топотипы и генетические линии была изучена на культуральных препаратах вируса из коллекции ФГБУ «ВНИИЗЖ». Всего было протестировано 16 изолятов вируса ящура типа А, 12 изолятов типа О, 7 изолятов типа Азия-1, 1 изолят типа С и по 2 изо- лята типов SAT-1, SAT-2 и SAT-3. Со всеми изолятами в ОТ-ПЦР-РВ был получен положительный результат (табл. 3). Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека