1-248.indd

103 Болезни птиц транскриптазную ПЦР в режиме реального времени, а также класси- ческую ПЦР. Согласно современным стандартам Всемирной организации здравоохранения животных (МЭБ), международному уведомлению подлежат случаи обнаружения вируса подтипов Н5 и Н7 ввиду их эпизоотического потенциала [7]. Однако для уточнения сложившей- ся ситуации, определения возможных рисков, разработки эффек- тивных ветеринарно-санитарных мероприятий необходима оценка патогенных свойств инфекционных агентов в максимально сжатые сроки. Наибольший практический интерес представляет определе- ние нуклеотидной последовательности фрагмента гена гемагглюти- нина (НА), кодирующей сайт нарезания одноименного белка. Уста- новлено, что сайт высоковирулентных вирусов гриппа содержит ряд основных аминокислот, прежде всего аргинин (R) и лизин (K); предположительно, такая структура способствует посттрансляци- онному нарезанию гемагглютинина более широким спектром фер- ментов и отчасти обуславливает пантропные свойства. Например, сайты нарезания эпизоотических вирусов высокопатогенного грип- па птиц подтипа Н5 имеют структуры RRRKKR*GLF, RKKR*GLF, REKRRKKR*GLF, REIRRKKR*GLF и др. Для сравнения, один из сайтов низковирулентных вирусов подтипа Н5 имеет широко рас- пространенное сочетание аминокислот RETR*GLF, и агент не вызы- вает каких-либо признаков болезни при заражении цыплят [1-3, 7]. Особенностью низковирулентных вирусов гриппа подтипов Н5 и Н7 является способность резко менять вирулентные свойства при циркуляции в популяции восприимчивых птиц (в особенности кур и индеек). Как правило, приобретение вирулентных свойств сопря- жено и с появлением в сайте нарезания НА аргинина и лизина, при- чем на сегодняшний день описаны не менее 5 основных механизмов таких изменений. Для определения последовательности фрагмента гена, кодирующего сайт нарезания гемагглютинина, а также целого гена или генома вируса наиболее часто используется метод нуклео- тидного секвенирования (метод Сэнгера), однако в последние годы распространение приобретают и другие инновационные методы. Анализ нуклеотидных и соответствующих им аминокислотных последовательностей вируса гриппа позволяет получить дополни- тельную информацию о биологических свойствах инфекционного Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека