NED373393NED

91 Пищевая безопасность Проведение дисперсионой жидкостно-жидкостной микроэкстрак- ции (DLLME). К 2 мл ацетонитрильного экстракта (после проведения QuEChERS) добавляли 0,3 мл экстрагента (хлороформа). В коническую пробирку на 15 мл вносили 5 мл воды. Затем шприцем в пробирку вводили 2 мл экстракта, содержащего хлороформ. Агрегирование частиц эмульсии в отдельную фазу осуществляли центрифугированием. Для этого исполь- зовали лабораторную медицинскую центрифугу ОПН-3М со скоростью вращения 2700 об/мин в течение 10 мин. Экстракт собирался на дне цен- трифужной пробирки и отбирался с помощью микрошприца. Растворитель испаряли под струей азота досуха, сухой остаток растворяли в 50 мкл дери- ватизационного раствора. Эффективность концентрирования определяли коэффициентом концен- трирования К. Он рассчитывается как отношение концентрации опреде- ляемого вещества в экстракте С экс (нг/мл) к его концентрации в матрице С 0 (нг/мл) в начальный момент: К = С экс / С 0 . Дериватизация афлатоксинов В1 и G1. Сухой остаток (после проведе- ния DLLME) растворяли в 50 мкл 0,3%-ного раствора йода в метаноле, пе- ремешивали, выдерживали 5 мин при комнатной температуре в темноте и проводили ВЭЖХ. Высокоэффективная жидкостная хроматография. Определение афла- токсинов проводили на жидкостном хроматографе Flexar (Perkin Elmer) с флуориметрическим детектором. Детектирование осуществляли при дли- нах волн возбуждения 340 нм и эмиссии 450 нм. Для разделения афлаток- синов использовали хроматографическую колонку Kromasil 100-3.5 C18, размером 150×4,6 мм, диаметром частиц 3,5 мкм. Объем пробы, вводимый в колонку, составлял 10 мкл. Анализ проводили в режиме градиентного элюирования с программированием скорости подачи элюента: Время, мин Скорость, мл/мин Насос В (ацетони- трил), % Насос А (вода), % 0 0,7 30 70 11 0,7 30 70 12 1,1 35 65 25 1,1 35 65 26 0,7 30 70 28 0,7 30 70 Хроматограмма стандартной смеси TS-108 (Trilogy Analytical Laboratory, USA) с концентрацией афлатоксинов В1, G1 – 5,0 нг/мл и В2, G2 – 1,25 нг/мл приведена на рис. 1. Электронная Научная СельскоХозяйстве ная Библиотека