NED373393NED

66 Болезни сельскохозяйственных животных F:5’GGATGAGGTGACTAAGAAAG3’) по 0,8 мкМ, ДНК-зонд (5’FAM CTCTTTGCAGGCATTTCTGACTGGGC BHQ2 3’) 0,8 мкМ, Taq-ДНК- Полимераза (Promega) 5 ед.акт., суммарная ДНК 10 мкл, вода 20 мкл. Температурный режим реакции: прогрев реакционной смеси – 94°С 10 мин; денатурация – 94°С 20 с; отжиг праймеров и учет данных – 58°С 20 с; элон- гация – 72°С 20 с. Количество циклов 40. Результаты и обсуждение Методом ПЦР были исследованы пробы от птиц из 54 хозяйств, ИФА – из 131. По данным Росптицесоюза в РФ насчитывается около 450 крупных птицефабрик. Таким образом, мониторингом было охвачено 10% птице- фабрик в исследованиях методом ПЦР и 23% – ИФА. Пробы внутренних органов кур были получены из 34 регионов РФ, сывороток крови – из 47. Исследования методом ПЦР проводили с пробами, поступившими из 29 птицефабрик мясного направления и 21 – яичного, 4 хозяйств c родитель- ским поголовьем. Серомониторинг охватил 59 птицефабрик яичного на- правления, 54 – мясного и 18 хозяйств – с родительским поголовьем. Таким образом, мониторингом была охвачена значительная часть птицефабрик РФ. С помощью метода ПЦР в режиме реального времени было исследовано 740 проб внутренних органов птиц. Положительный результат получен с пробами из 14 птицефабрик, что составило 25% от общего числа хозяйств, где проводились исследования. Следует отметить, что для ряда птицефа- брик были сделаны повторные исследования через разные интервалы вре- мени (6 месяцев и более). Как правило, результаты ПЦР повторялись, т.е. наблюдали длительную персистенцию вируса в поголовье. Для исследований использовали пробы от больных кур, если для поста- новки диагноза требовалось исключить инфекционные неопластические заболевания (болезнь Марека и лейкоз птиц). В материале из двух хозяйств наблюдали выраженные неопластические изменения в виде диффузных опухолей в печени и селезенке от птиц возраста 200 сут. и более. Пробы по- казали положительный результат в ПЦР. В остальных случаях геном ALV-J выявляли в пробах от птиц, у которых наблюдали патологические измене- ния (гепатит, нефрит, дистрофия и т.п.), характерные для широкого спектра заболеваний. Случаи выявления инфекции ALV-J не позволили установить какую- либо зависимость от места их географического расположения. Вероятнее всего, ключевую роль в распространении вируса играет комплектование хо- зяйств инфицированным поголовьем. С помощью ПЦР геном ALV-J выяв- Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека