NED373393NED

65 Болезни сельскохозяйственных животных ду экзогенным ALV и эндогенным ретровирусом птиц. Дальнейшие иссле- дования показали, что к инфекции ALV-J чувствителен широкий спектр линий и пород кур [2, 3]. Характерной особенностью инфекции ALV-J яв- ляется индукция быстро развивающегося миелоидного лейкоза. Особенно чувствительны к данной инфекции породы кур мясного направления. Родительское поголовье бройлеров поражалось в 6-12-мес. возрасте с образо- ванием опухолей и высокой смертностью. Полученное от таких родителей потомство было инфицировано ALV-J, что ухудшало производственные по- казатели [6]. Информация о распространении заболевания на птицефабриках РФ представлена очень ограниченно. Поэтому целью данных исследований послужило изучение распространения лейкоза птиц ALV-J в хозяйствах РФ. Для мониторинга использовали вирусологические, серологические и молекулярно-биологические методы. Материалы и методы Патологический материал. Для определения серологического стату- са птиц и выявления случаев циркуляции вируса в поголовье тестировали пробы крови и внутренних органов кур (печень, селезенка, бурса, почки) различных возрастных групп из птицефабрик мясного и яичного направ- ления из различных регионов РФ. Также исследовали пробы из племенных хозяйств. Культивирование ALV-J проводили на первичной культуре фибробластов эмбрионов кур (ФЭК), для получения которой использовали 12-сут. эмбри- оны SPF-кур (Lohmann, Германия). Для получения монослоя ФЭК приме- няли флаконы с площадью роста 25 см 2 (Corning, США). Для роста клеток применяли смесь сред Лейбовица (Sigma, США) и Маккоя (Sigma, США) в соотношении 2:1 и 10% фетальной сыворотки КРС (Bioclot, Бразилия). Для поддержания жизнедеятельности культуры применяли аналогичную смесь сред с добавлением фетальной сыворотки КРС до 2% содержания. Иммуноферментный анализ (ИФА). Сыворотки крови кур тестировали с помощью коммерческого набора для выявления антител к вирусу лейкоза птиц подгруппы J иммуноферментным анализом (Synbiotics, США). Полимеразная цепная реакция (ПЦР). Выделение РНК про- водили с помощью коммерческих наборов «Рибо-сорб-50» (ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора, Россия) согласно прила- гаемому протоколу. Состав реакционной смеси: ПЦР-буфер (Promega), MgCl 2 (Promega) 2,5 мМ, dNTP’s (Fermentas) 0,4 мМ каждого, праймеры (R:5’CGAACCAAAGGTAACACACG3’ Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека