NED373393NED

138 Общие вопросы нитной мешалке. К смеси в количестве 20,0 см 3 добавляли 6,6 см 3 стериль- ного 50%-ного раствора ПЭГ–6000 в течение 30 мин при постоянном по- мешивании. Доводили рН смеси 1М раствором трис до 8,0, добавляя его по каплям при постоянном помешивании на магнитной мешалке в течение 10 мин. Смесь центрифугировали при 7000 g в течение 15 мин при темпера- туре 4–6°С. Супернатант отбирали и доводили рН 1М раствором уксусной кислоты до 7,6. В процессе исследований определяли инфекционность, величину ре- дукции вируса, чувствительность тест-системы и прецизионность исполь- зованных методов. Инфекционность исходной вирусной суспензии, а также после добав- ления в вирусную суспензию ПЭГ или ПЭГ и С1-ингибитора, определяли трехкратно и выражали в lg ТЦД 50 /см 3 . Рассчитывали коэффициент вариа- ции (прецизионность) по формуле: V = δ/Х × 100%, где δ – среднее квадратичное отклонение; Х – среднее значение показателей инфекционности. Чувствительность исследований определяли с учетом числа положи- тельных и ложноположительных проб. Результаты и обсуждение Согласно международным требованиям эффективными считаются ста- дии процедур удаления или инактивации вирусов, равные 4,0 lg и более. Стадии удаления 1,0 lg и менее не могут быть значимыми. Продукт счи- тается безопасным при условии, что процесс удалил вирусную инфекцию в намного большей степени, чем уровень вирусов в стартовом материале. В результате проведенных исследований было установлено наличие редукции вируса болезни Ауески после добавления ПЭГ. Более выра- женное снижение специфической активности выявлено после добавле- ния в вирусную суспензию ПЭГ и С1-ингибитора (табл. 1). Так титр ис- ходного вируса при изучении редукции двух серий С1-ингибитора был в пределах 7,16±7,83 lg ТЦД 50 /см 3 , средний – 7,323±0,092 и 7,660±0,134 lg ТЦД 50 /см 3 . После внесения ПЭГ в вирусную суспензию титр вируса пони- жался до 4,83–5,17 и 5,23–5,66 lg ТЦД 50 /см 3 , соответственно. Общее среднее значение титра было 5,203±0,083 lg ТЦД 50 /см 3 . Средний коэффициент ре- дукции составил 2,323±0,082 и 2,250±0,090, а общий средний – 2,287±0,083 lg ТЦД 50 /см 3 . При смешивании вирусной суспензии с препаратом С1 и ПЭГ средний титр вируса был 1,663±0,061 и 2,547±0,057 lg ТЦД 50 /см 3 , а общее среднее Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека