NED373393NED

137 Общие вопросы тивных документов необходимо переходить на международные правила, обес- печивающие вирусологическую безопасность лечебных препаратов [1, 2]. Выбор вирусов для валидации вирусологической безопасности про- дуктов основан на европейских руководствах для исследования валидации вируса в производных плазмы [4, 5, 7, 8]. Для этого используются 5 виру- сов, из которых 3 – РНК-содержащие с липидной оболочкой и 2 – ДНК- содержащие без липидной оболочки, относящихся к различным семейст- вам – Flavi- , Retro- , Herpes- , Parvo- и Picornaviridae . Они отличаются друг от друга размерами и могут переноситься кровью. Допускается проведение исследований с использованием модельных вирусов. В медицинской практике для лечения гемофилии используются фак- торы свертывания крови. С терапевтической целью широко применяются иммуноглобулины и ингибиторы, в том числе С1-ингибитор, которые полу- чают из плазмы человека. С1-ингибитор обладает широким лечебным дей- ствием – ингибирует воспаление при таких состояниях, как сепсис, острая миокардиальная инфекция, а также обладает высоким эффектом при отеке кожи или слизистой, обусловленным недостаткам С1-ингибитора [3, 6]. Целью наших исследований было изучить возможность разработки метода валидации вирусологической безопасности С1-ингибитора при ис- пользовании вируса псевдобешенства, выбранного в качестве модельного для вирусов с липидной оболочкой (LE), таких, как вирус гепатита В. Материалы и методы В работе использовали модифицированный вирус болезни Ауески штамм «ВК», полученный путем заражения перевиваемой культуры клеток ВНК-21 с титром инфекционности 7,323±0,092 ТЦД 50 /см 3 . Редукцию ви- руса определяли методом преципитации стерильным полиэтиленгликолем 6000 (ПЭГ), а также в сочетании с полиэтиленгликолем и С1-ингибитором. Эксперименты проводили, исследуя две серии С1-ингибитора в трех по- вторностях. Контролем служил исходный вирус. При подготовке исследуемой пробы к вирусной суспензии в объеме 20,0 см 3 в стерильном флаконе на магнитной мешалке при постоянном перемешива- нии добавляли 6,6 см 3 стерильного раствора ПЭГ–6000 по каплям в течение 30 мин. Смесь доводили до рН 8,0 1М раствором трис, внося его по каплям в течение 10 мин при температуре 4–6°С. Полученную смесь центрифугировали при 7000 g в течение 15 мин при температуре 4–6°С. Супернатант отбирали и доводили рН раствором 1М уксусной кислоты до 7,6. При подготовке следующей пробы вирусную суспензию смешивали с препаратом С1 в соотношении 1:9 при постоянном помешивании на маг- Электронная Научная СельскоХозяйственная Б блиотека