NED373390NED

92 Ящур и другие болезни крупного рогатого скота и свиней По структуре капсулярных полисахаридов и липополисахаридов раз- личают 15 серотипов A. pleuropneumoniae , которые относятся к двум био- варам: NAD-зависимому биовару I и NAD-независимому биовару II (4, 6). Серотипы различаются по вирулентности: 1, 2, 5, 7, 9, 10 и 11 серотипы являются высоковирулентными, серотипы 3, 4, 6, 8 и 12 – низковирулент- ными (2). Лабораторная диагностика актинобациллёзной плевропневмонии основана на обнаружении у больных животных возбудителя болезни или антител к нему. Для серологической диагностики традиционно исполь- зуются тесты на основе липополисахаридов (ЛПС). Реакции на основе ЛПС являются типоспецифичными, что, учитывая существование 15 серотипов A. pleuropneumoniae , делает серодиагностику трудоемким и затратным процессом. Кроме того, недавно было показано, что непа- тогенные виды актинобацилл индуцируют у свиней выработку анти- тел, перекрестно реагирующих с серотипами 1 и 9 A. pleuropneumoniae (5). Это снижает диагностическую специфичность серодиагностики на основе ЛПС-тестов. В 2004 г. Dreyfus et al. показали, что перспективным методом серо- диагностики актинобациллёзной инфекции является иммуноферментный анализ на основе рекомбинантного токсина ApxIV. Этот токсин является высокоиммуногенным, он специфичен только для A. pleuropneumoniae и продуцируется всеми 15 серотипами бактерии (3, 7). Кроме того, ApxIV продуцируется бактерией только in vivo (т.е. при инфицировании жи- вотных), но не в условиях in vitro (при культивировании на питательных средах). Таким образом, обнаружение антител к ApxIV является по сути DIVA-тестом, позволяющим дифференцировать инфицированных живот- ных от вакцинированных. В 2007 г. фирма IDEXX сообщила о разработке диагностического на- бора «IDEXX CHEKIT APP-ApxIV», который основан на использовании ApxIV в качестве антигена и «является единственным серологическим те- стом, перекрывающим все серотипы Actinobacillus pleuropneumoniae без ложноположительных результатов, вызванных перекрестными реакциями с другими бактериями» (2). В России аналогичные тест-системы не разрабатывались. Цель нашей работы заключалась в получении рекомбинантного белка ApxIV и разра- ботке на его основе ИФА для выявления антител к A. pleuropneumoniae в сыворотках крови свиней. Электронная Научная СельскоХозяйственн я Библиотека