NED373390NED

Вопросы биотехнологии 255 ное время, не разрушаясь, присутствовали в культуральной среде. При та- ком развитии биологической системы помутнения в самой культуральной среде не наблюдали. На бактериальных средах МПБ, МПА, тиогликолевая и среда Сабуро не выявляли признаки присутствия артефактов культураль- ных контаминантов. ПЦР-диагностика показала латентное присутствие микоплазм. На цитохимических препаратах микоплазмы не были обнару- жены. По литературным данным (4), ярко-зелёное свечение полиморфных гранул, (при исследовании в люминесцентном микроскопе) соответствует хламидийной контаминации. Цитопатичекие проявления также подтверж- дали наличие этой инфекции. Но ПЦР-исследование культуры клеток на наличие хламидий sр . (общий праймер для всех хламидий) показало от- сутствие этого микроорганизма. Известно, что хламидии относятся к внутриклеточным контаминан- там (2, 4). Существуют клеточные линии, хронически контаминированные хламидиями, например, ПС (почка сайгака) (5), которая используется как модельная система. Для вирусологических целей присутствие хламидий нежелательно, так как они могут влиять на нормальную репродукцию ви- русов. Но в данном случае, по нашим предположениям, хламидии, обнару- женные цитохимическим методом и не подтвержденные с помощью ПЦР, могли попасть в эмбрионы гусей из водоёмов, а конкретнее – из поедаемо- го животными планктона, в котором присутствуют амёбы. Естественным паразитом амёб (возможно – симбионтом) является Рarachlamydiaceae acanhamoebae, которая по современной классификации относится к се- мейству Parachlamydiaceae (3, 4). Различия в последовательностях ДНК с другими семействами хламидий достигают более 20%. Представители семейства Parachlamydiaceae не идентифицируются моноклональными антителами, специфическими для антигенного комплекса ЛПС (липопо- лисахарида) семейства Chlamydiaceae (4). Вероятно, поэтому праймеры, предназначенные для патогенных хламидий теплокровных животных, не улавливают ДНК парахламидий. Очевидно, что многие латентные контаминанты клеточных культур передаются вертикально от животных-доноров. При отсутствии в питатель- ных средах факторов гуморального и клеточного иммунитета латентные микроорганизмы могут постепенно количественно изменяться в сторону увеличения. В данном случае могла сработать такая цепь передачи: от амёб, контаминированных парахламидиями, через гусей – в эмбрионы и, после трипсинизации последних – в клеточную культуру. Также очевидно, что без специфической санации происходит нарастание цитопатического действия ДНК-контаминанта при длительном пассировании клеток эмбриона гуся. Электро ная Научная СельскоХозяйственная Библиотека