NED373390NED

Вопросы биотехнологии 241 Результаты и обсуждение На первом этапе исследований определяли начальную адгезию пер- вичных клеток ПТ, формирование монослоя и индекс пролиферации. Суспензию клеток в концентрации 100; 200; 300; 400 тыс/см 3 высе- вали в матрасы РУ. Через 1, 3, 24 ч считали количество адгезированных клеток. Уровень адгезии клеток устанавливали после удаления из матра- сов взвеси неприкрепившихся клеток, ополаскивания прикрепившихся клеток солевым раствором Хенкса и путем подсчета снятых трипсином со стекла клеток. На 3 сутки культивирования однослойной культуры клеток ПТ отмечали формирование монослоя и учитывали индекс пролиферации. Полученные результаты представлены в таблице. Из данных таблицы видно, что в течение 24 ч число адгезированных в матрасах клеток при разных посевных концентрациях находилось при- мерно на одном уровне. Седиментация и адгезия клеток почти полностью завершилась спустя 1 ч после высева в матрасы первичной клеточной су- спензии. При подсчете прикрепившихся клеток через 1 ч было замечено, что во время слива надосадка некоторые клетки сползали из-за слабой связи с субстратом. Крепкая связь клеток с поверхностью сосудов форми- ровалась спустя 3 ч, вследствие чего снижалась вероятность случайного их отслоения, с другой стороны – клетки ещё не начали активно пролифе- рировать и не могли изменить истинной картины адгезии. Таблица Адгезия, формирование монослоя, пролиферативная активность первичной культуры клеток ПТ в зависимости от посевной дозы Посевная концентра- ция клеток, тыс/см 3 Количество адгезированнных клеток, тыс/см 3 Формиро- вание монослоя на 3 сутки, % Количество клеток в монослое на 3 сутки, тыс/см 3 Индекс пролифе- рации на 3 сутки 1 ч 3 ч 24 ч 400 16,0±0,35 18,0±0,42 20,0±1,33 100 78±1,73 3,8 300 12,0±0,27 13,5±0,31 15,0±0,10 100 42±0,93 2,8 200 8,0±0,18 9,0±0,20 10,0±0,66 60 15±0,33 1,5 100 4,0±0,09 4,5±0,11 5,0±0,31 10 5±0,11 0 Количество взвешенных в культуральной жидкости клеток во всех случаях через 1, 3, 24 ч после высева суспензии оставалось на одном уров- не, что свидетельствует о прекращении процесса адгезии в одно и то же время при всех испытанных концентрациях. Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека