NED373390NED

Ящур и другие болезни крупного рогатого скота и свиней 15 на сорбенты, метод осаждения полиэтиленгликолем и ультрафильтрация. При промышленном концентрировании вирусного антигена чаще применя- ют метод сорбции на ГОА. Потери при этом составляют менее 10% (1, 2). Путем элюирования вируса ящура с ГОА стало возможным оценить эффективность концентрирования вируса количественно. В многочислен- ных опытах были получены оптимальные условия сорбции и элюции ви- руса ящура на ГОА, которые показали, что сорбционное равновесие уста- навливается в течение нескольких минут (меньше 5-ти минут), а элюция вируса 1/3М ФБР наступает уже через 10 минут. Зависимости сорбции и элюции от времени не наблюдалось. Отчетливо видна зависимость сорб- ции вируса от концентрации ГОА, находящейся в смеси. Возможность удаления вируса с коллоидальной ГОА при помощи 1/3М ФБР (рН 7,5) позволяет проводить прямое и точное изучение процесса сорбции виру- са к ГОА. Сорбционная способность ГОА по отношению к вирусу ящура сильно зависит от концентрации сопутствующих протеинов (3, 4). Материалы и методы В опытах использовали производственные штаммы культурального вируса ящура типов О и Азия-1. Для исследований использовали ГОА в концентрациях 0,2% и 0,3%. Метод элюирования, предложенный Matheka в 1959 г. (3, 4), основан на применении 1/3 М ФБР для проведения элюции. После адсорбции вируса на ГОА смесь центрифугировали при 1000 об/мин в течение 20 минут, надосадочную жидкость удаляли, в ней прове- ряли содержание растворимых белков. Осадок промывали изотоническим раствором NaCl или стерильной дистиллированной водой и опять центри- фугировали. В надосадке определяли количество растворенных белков и содержание общего вирусного белка. Для изучения элюции была испытана ПАК и ее сополимеры. Ад- сорбированный на ГОА культуральный вирус ящура типа О промывали стерильной дистиллированной водой и выполняли элюцию 0,25, 0,5 и 1% концентрациями сополимеров ПАК:ПВПД 25:75 состава (мольн %), об- разцы № 2 и № 4 и сополимеров ПАК:ПВПД 50:50 состава (мольн %), образцы № 1 и № 3. Работу проводили с неинактивированным вирусом. В элюатах определяли титр инфекционной активности и рассчитывали по- тери вируса. В качестве контроля использовали очищенную суспензию. Иммуногенную активность концентратов-элюатов исследовали в соста- ве сорбированной противоящурной вакцины, изготовленной из вируса типа Азия-1 Иран58/99. Антиген концентрировали сорбцией на ГОА и элюирова- Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека