NED373390NED

104 Ящур и другие болезни крупного рогатого скота и свиней респираторный синдром, классическая чума, парвовирусная инфекция, цирковирусная инфекция, болезнь Ауески, трансмиссивный гастроэнте- рит и микоплазмоз. В качестве контрольных сывороток использовали сыворотку крови свиньи, не имеющую антител к вирусу ВБС (отрицательный контроль), и сыворотку крови от переболевшей ВБС свиньи (положительный кон- троль). Реакция микронейтрализации (РМН). Реакцию микронейтрализации выполняли, как описано ранее (5, 14). Вируснейтрализующим титром антител исследуемой пробы сыворотки, выраженным в log 2 , считали пре- дельное разведение сыворотки, при котором происходила нейтрализация инфекционного действия 100 ТЦД вируса ВБС в 50% зараженной куль- туры клеток IB-RS-2. Положительным считали значение титра, соответ- ствующее 5,5 log 2 . Непрямой вариант ИФА (Н-ИФА). Реакцию Н-ИФА проводили по стандартной схеме, как описано ранее (10), с некоторыми модификациями. Контрольные и исследуемые пробы вносили непосредственно в лун- ки планшета в разведении 1:20 в повторностях в буферном растворе ТБСТ (0,02М Трис-НСl, 0,15М NaCl, 0,05% Твин-20), дополненном 5% феталь- ной сывороткой (ФС-ТБСТ). Антисвиной иммунопероксидазный конъю- гат (производство филиала «МЕДГАМАЛ» ГУ НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН) использовали в рабочем разведении в ФС-ТБСТ 1:2000. Окраши- вание производили с помощью субстратной смеси АБТС. Реакцию учи- тывали с помощью многоканального спектрофотометра. Значения опти- ческой плотности (ОП) контрольных и исследуемых проб переводили в значение процента позитивности (PР) по формуле: где ОП – среднее значение оптической плотности исследуемой пробы; ОП - – среднее значение оптической плотности отрицательного кон- троля; ОП + – среднее значение оптической плотности положительного кон- троля. Позитивно-негативный порог (ПНП) для проведения качественного анализа устанавливали, как описано ранее (10). Значения РР ≥ 20% счита- ли положительными. Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека