NED373390NED

Ящур и другие болезни крупного рогатого скота и свиней 103 мониторинговых исследований на ВБС. Использование непрямого вари- анта ИФА (Н-ИФА) позволяет решить эти проблемы, что делает его цен- ным инструментом при массовом скрининге большого количества проб сывороток крови. Выявление антител к вирусу ВБС в реакции Н-ИФА так- же выгодно отличается от традиционных серологических методов, таких как реакция нейтрализации, реакция связывания комплемента и реакция диффузной преципитации, простотой и скоростью постановки реакции, возможностью компьютерной обработки результатов исследований, что не исключает комплексное использование перечисленных методов для ре- троспективной диагностики ВБС. Целями нашей работы являлись разработка и оценка тест-системы для выявления антител к вирусу ВБС на основе Н-ИФА, обладающей про- стотой постановки, высокой специфичностью, чувствительностью и вос- производимостью, а также сравнение данной реакции с традиционным блокирующим вариантом ИФА, конкурентным вариантом ИФА, с рефе- рентным тестом Ceditest ® SVDV (Cedi-Diagnostics B.V., Нидерланды), в котором используется конкурентный вариант ИФА с моноклональными антителами, и реакцией микронейтрализации при исследовании проб сы- вороток крови свиней, экспериментально зараженных вирусом ВБС. Материалы и методы Вирус. Антиген вируса ВБС для ИФА получали из вируссодержащей суспензии вирулентного штамма Одесса 72 (О-72), репродуцированного в перевиваемой культуре клеток IB-RS-2. Вирусные частицы преципитиро- вали 8% раствором полиэтиленгликоля (м.м. 6000 Д) с добавлением NaCl до конечной концентрации 0,9% с последующей обработкой хлороформом и концентрировали ультрацентрифугированием в 300 раз. Перед нанесе- нием на планшеты антиген инактивировали при 56°С в течение 1 часа. Сыворотки. Исследуемым материалом служили: 43 пробы сывороток крови от свиней, экспериментально зараженных вирусом ВБС; 22323 про- бы сывороток крови от клинически здоровых, не вакцинированных против ВБС свиней, поступавших из свиноводческих хозяйств РФ с ноября 2007 г. по январь 2009 г.; лиофилизированные пробы сывороток крови экспери- ментально зараженных вирусом штамма О-72 свиней разных серий, хра- нившиеся в музее штаммов лаборатории ящура и везикулярных болезней ФГУ «ВНИИЗЖ»; гетерологичные пробы сывороток, полученные от сви- ней после заражения вирусами, вызывающими везикулярные инфекции (энтеровирус свиней, везикулярная экзантема, ящур); пробы сывороток против возбудителей других болезней свиней, таких как репродуктивно- Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека