NED373389NED

400 Вопросы биотехнологии Материалы и методы В работе использовали реактивы отечественного и зарубежно- го производства: • PPLO-микоплазма-бульон «Sigma», США; • PPLO-микоплазма-бульон «Difco», США; • PPLO-микоплазма-бульон «Нimedia», Индия; • «BBL TM Mycoplasma Broth Base», Франция; • аутолизат дрожжей сухой «Difco», США; • сухой дрожжевой экстракт (пр-во Чехия); • живые прессованные дрожжи (пр-во спиртзавод «Петров- ский», Ивановская обл.). Кроме этого, в состав среды вошли следующие компоненты, используемые для выращивания микоплазмы: индикатор феноло- вый красный, бензилпенициллина натриевая соль, глюкоза, ацетат талия, сыворотка крови свиней. Аутолизат дрожжей сухой и сухой дрожжевой экстракт добав- ляли в сухом виде в количестве 15 г на 1 литр среды (5,7,8), из 35 г живых прессованных дрожжей готовили супернатант суточного на- стоя, который вносили в 1 литр среды. Приготовленную среду стерилизовали методом фильтрации через линию префильтров (КТФ), асбестовых пластин Seitz (фирма «PALL», Германия) и фильтр-патрона стерилизующего с диаметром пор 0,22 мк («PALL», США). Работу проводили с производственным штаммом «S6» Mycop- lasma gallisepticum . С твердых питательных сред клонировали ми- коплазму в эппендорфы с жидкими питательными средами, приго- товленными из PPLO-микоплазма-бульона разных производителей, в состав которых входили различные дрожжевые экстракты. Урожайность и качество полученной биомассы контролирова- ли по оптической плотности (ОП) на спектрофотометре (2) и в РГА, которую ставили по общепринятой методике с раститровкой анти- гена двойным шагом (log 2 ГАЕ). Результаты и обсуждение Ростовые свойства питательных сред сравнивали в течение 5 пассажей в идентичных условиях. Значительную роль для произ- Электронная Научная СельскоХозяйстве ная Библиотека